吴志红分子生物学实验备课记录
实验1： 质粒DNA的提取、纯化和检测
图：pUC19质粒图谱
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吴志红分子生物学实验备课记录
试验思考引导
1 2 3 4 5 问题 何谓质粒？其大小？与宿主的关系如何？ pUC19的大小和质粒图谱？ pUC19的Apr、ori(rep)、lacZ(lacZ’) 和MCS的意义和作用？ 质粒在细胞内的构型有哪些？ 质粒提取过程中，哪些因素会引起其构型的变化？如何变化？提取的质粒会有哪些构型？ 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 相应原理 E.coli DH5α菌株特性 如何有效裂解细胞，释放细胞内容物？ 如何将质粒DNA与染色体DNA分离？检测中如何判断？ 如何将质粒DNA与细胞RNA组分分离？检测中如何判断？ 如何将质粒DNA与细胞的蛋白组分分离？检测中如何判断？ 琼脂糖凝胶电泳的缓冲液选择原则？ 琼脂糖凝胶电泳的浓度选择原则？ 琼脂糖凝胶电泳胶版大小的确定和选择原则？ 琼脂糖凝胶电泳点样孔大小的确定和选择原则？ 同一质粒的不同构型，在电泳中的迁移速率的差异？ 在凝胶上的表现行为如何？ 16 同一构型的不同大小的质粒或者片段在电泳时的迁移率差异？在凝胶上的表现行为如何？ 17 提取的质粒能否与λ/HindIII片段比较？ - 2 -
