硫酸铵沉淀法
硫酸铵沉淀法(Ammonium sulfate precipitation)是一种常用的蛋白质纯化方法。其原理是利用硫酸铵对蛋白质的沉淀作用进行蛋白质的分离和纯化。硫酸铵对蛋白质的沉淀作用是由于硫酸铵对蛋白质中的部分疏水性氨基酸侧链产生物理分离作用的结果。
硫酸铵沉淀法的步骤如下:
1. 加入适量的硫酸铵至蛋白质溶液中,使溶液中的硫酸铵浓度达到一定值,使蛋白质沉淀。
2. 用离心将沉淀分离出来。
3. 溶解沉淀并用适当的缓冲液进行层析纯化。
硫酸铵沉淀法的优点是简单易行,沉淀效果好,适用范围广,并且可以采用多次沉淀提高纯化程度。缺点是会降低蛋白质的活性并且会引入硫酸铵等离子体,可能对下游应用造成影响。