维普资讯 http://www.cqvip.com 中国兽药杂志 ２００６，４０（６）：８—１０／陈进喜，等 鸡球虫微囊型口服疫苗免疫效果的初步研究 陈进喜，陈汉忠，谢婷，周天政，李芳，秦辉凌，卢小燕 （广西大学动物科学技术学院，广西南宁５３０００４） ［收稿日期］２００５—１０—２４［文献标识码］Ａ［文章编号］１００２—１２８０（２００６）０６ ０００８—０３［中图分类号］￥８５９．７９７ ［摘要］ 应用本研究室研制的微囊型口服鸡球虫疫苗，通过拌料口服免疫法，测定了微囊型口 服鸡球虫疫苗不同免疫次数的免疫效果。实验结果表明：经两次拌料口服免疫的鸡只在实验性 攻虫后，其发病率、死亡率、病变记分、血便记分、料肉比等各项指标均低于一次免疫组和感染对 照组，说明在免疫两次后鸡机体对鸡球虫产生了较好的免疫力，有了明显的抵抗鸡球虫的能力， 而只免疫一次的鸡只较免疫两次的鸡只抗鸡球虫的能力弱。微囊型口服鸡球虫疫苗使用方便， 易于在生产中推广使用。 ［关键词］ 微囊疫苗；鸡球虫病；效果 球虫病是养鸡业中最普遍、危害最严重的疫病 雌雄随机，购自广西南宁正大畜牧有限公司。 之一，每年都给养鸡业带来巨大的经济损失，全球 １．２微囊球虫疫苗的制作孢子化鸡球虫弱毒疫 每年因鸡球虫病造成的损失高达２０亿美元，抗球 苗购自北京农学院，根据所需剂量按比例与一定浓 虫药每年的销售额是３．２亿美元¨ ；我国抗球虫药 度海藻酸钠溶液（２％～５％）混合，以一定的速度将 年销售额可达６亿～１８亿元人民币 Ｊ。 其注入凝固剂内成型，制成直径２．５ ｍｍ左右的微 在我国，目前对鸡球虫病的防治主要还是以药 囊，制好的微囊型疫苗置于４℃冰箱中保存备用。 物治疗为主，但由于球虫极易产生抗药性，至今已 每１０个微囊为一头份（理论值：每个微囊平均含卵 差不多对所有的抗球虫药都产生了抗药性，致使生 囊１０个），即一免和二免每只鸡的免疫量为１００个 产上几乎到了无药可用的地步，由此引发的问题也 卵囊。 越来越多－３ Ｊ。近年来，应用球虫疫苗预防鸡球虫 １．３感染卵囊从南宁市郊区养鸡场中收集感染 病的方法已受到许多国家的重视，有的国家和地区 鸡球虫病鸡的新鲜粪便，应用饱和盐水漂浮法和离 已逐渐使用球虫疫苗取代抗球虫药，例如欧盟现在 心沉淀法收集混合卵囊，将收集到的混合卵囊置于 约８０％的鸡群使用球虫疫苗；我国的鸡球虫疫苗年 ２．５％重铬酸钾溶液平皿中，于２３—２９℃培养至孢 销售量估计为１．５亿一２．０亿头份，并仍在逐年增 子化，４℃保存备用。 长。疫苗的使用虽然解决了许多使用化学药物预 １．４饲料由广西大学东校园饲料厂按小鸡的营 防球虫病存在的问题，但传统的疫苗在剂型和使用 养需求单独配制，不添加任何抗生素和其他抗球虫 方法上（如饮水免疫等）都存在着不同程度的缺陷， 药物的粉状饲料。 生产上迫切需要使用更为方便有效的疫苗。本研 １．５试验方法剔除试验用１日龄雏鸡中体重参 究应用我校寄生虫组研制的鸡球虫微囊型疫苗，通 差显著和病弱者，随机分为４组，每组１０只，即１ 过混饲免疫鸡，初步研究了这种球虫疫苗新剂型的 次免疫组、２次免疫组、感染对照组和空白对照组。 免疫效果。 并逐只进行称重记录。各组平均初重如下：２次免 １材料和方法 疫组４２３ ｇ，１次免疫组４１７ ｇ，感染对照组４３３ ｇ，空 １．１实验动物１日龄艾维茵鸡苗（ＡＡ鸡）５０只， 白对照组４２０ ｇ。第１天对１次免疫组、２次免疫组 作者简介：陈进喜（１９８３年一），男，福建云霄人，学士，主要从事寄生虫病防治研究。 维普资讯 http://www.cqvip.com ２００６，４０（６）：８—１０／陈进喜，等 中国兽药杂志 ・９・ 进行第１次免疫，即将免疫量的疫苗微囊拌于适量 统进行判断 ：０分表示盲肠壁无肉眼可见病变， 饲料中，让鸡自由采食；第８天对２次免疫组进行 内容物正常；＋１分表示盲肠壁散布少数出血斑点， 第２次免疫，方法同第１次；免疫后１周即第１５ 盲肠壁不变厚，内容物正常；＋２分表示盲肠坏死巢 天，除空白对照组外，其余各组鸡只，每只经口感染 增多，并且内容物可见血迹，肠壁稍增厚，内容物正 ３万个孢子化卵囊（简称攻虫，下同）。攻虫后观察 常；＋３分表示盲肠充满大量血液或核心变性物，肠 记录各组鸡只的发病、死亡情况，攻虫后第８天即 壁显著增厚，肠内容物稀少；＋４分表示死亡或比 ２３日龄，称重后剖杀全部鸡只，检查记录肠壁病变 ＋３分的病变程度更严重者。 情况，记录试验期间消耗饲料量。 ２ 结果 １．６免疫效果的判断免疫效果的判断主要根据 １次免疫组和２次免疫组的鸡只免疫后精神、 攻虫后各组鸡只的增重与料肉比并结合鸡只的血 食欲、排粪正常。攻虫后感染对照组的鸡只全部出 便记分、病变记分等情况综合评判 Ｊ。 现精神沉郁、食欲废绝、饮欲增加、羽毛松乱无光泽 血便记分按照角田清５分制记分 。。：０分表示 等症状；１次免疫组有３０％出现了精神、食欲不振 实验鸡的粪便完全不带血，无其他异样变化；＋１分 症状；２次免疫组仅有１只出现精神、食欲不振症 表示不高于２５％的粪便带血或有黏液附着；＋２分 状；空白对照组鸡只在试验期间都精神饱满、食欲 表示大于２５％而小于５０％的粪便带血；＋３分表示 旺盛、毛色好、健壮。攻虫后第４天，感染对照组鸡 ５０％～７０％粪便带血；＋４分表示１００％粪便带血。 只开始排出稀粪，第５天排出血便；１次免疫组和２ 平均粪便记分＝各组粪便记分之和÷记录次数。 次免疫组虽出现少量血便，但各组均无鸡只死亡。 病变记分按照Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｒｅｉｄ球虫病变记分系 综合评价各项指标测定结果见表１。 表１ 抗球虫病疫苗两种不同免疫次数的免疫效果 ３讨论 病变记分为３．０分，２次免疫组和１次免疫组分别 ３．１ 从各组鸡只的生长情况来看，２次免疫组、１ 为２．３分和１．８分；感染对照组的血便记分为４ 次免疫组和感染对照组的相对增重率分别为 分，２次免疫组和１次免疫组分别为１分和２分，上 ９３．３％、７９．５％和６３．０％。各组的料肉比：空白对 述结果说明免疫组病变记分和血便记分均低于感 照组为１．９７：１，２次免疫组为２．０５：１，１次免疫组 染对照组，证明球虫疫苗拌料免疫对控制鸡球虫病 为２．２８：１，感染对照组为２．８３：１。从数据中可以 是有效的，且两次免疫的效果比一次免疫效果更 看出，两免疫组的增重率和料肉比虽都不及空白对 好。 照组，但都明显高于感染对照组，而２次免疫组又 ３．３本次试验应用微囊型鸡球虫疫苗对鸡进行２ 高于１次免疫组。上述结果说明，球虫疫苗对感染 次免疫，获得了较好的免疫效果，但１次免疫的效 球虫小鸡的生长有保护作用，而两种免疫方法中，２ 果较差。笔者对其原因进行了分析：从鸡摄食微囊 次免疫的效果明显优于１次免疫。 型疫苗的均匀情况来看，微囊型疫苗颗粒与鸡饲料 ３．２ 从发病情况来看，感染对照组发病率为 颗粒大小差不多，与饲料容易混合均匀，鸡在摄食 １００％，２次免疫组和１次免疫组分别为１０％和 时也是均匀的，不会出现多吃少吃的问题；对制成 ３０％，说明免疫组小鸡获得了较好的保护，２次免疫 的微囊内的卵囊进行观察记数，发现每个微囊中的 的保护效果优于１次免疫。本次试验由于我们选 卵囊数实际上只有理论值（滴服的免疫头份量）的 择了每只小鸡攻虫卵囊量仅为３万，属于低攻毒剂 ３０％～４０％，因此可能是在制作微囊的过程中，许 量，所以各实验组均无鸡只死亡，故死亡率都为０。 多卵囊被粘壁等作用消耗掉了，所以制作出来的微 从各组的病变记分和血便记分来看，感染对照组的 囊含卵囊量达不到原先理论设计的值，致使每只鸡 维普资讯 http://www.cqvip.com ・ｌＯ・ 中国兽药杂志 ２００６，４ｏ（６）：８—１０／陈进喜，等 摄食的疫苗卵囊量大大减少，这是造成１次免疫效 Ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ Ｏｎｅ—ｄａｙ－ｏｌｄ Ｂｒｏｉｌｅｒ Ｃｈｉｃｋｅｎｓ ａｇａｉｎｓｔ ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎｅ ａｎｄ 果不佳的主要原因。２免组由于通过两次免疫，免 Ｅ ｔｅｎｅｌｌａ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ，１９９２，３ １： ３２３—３３５． 疫应答得到了加强，所以仍然获得了较好的免疫效 ［２］郁明发．鸡球虫病［Ｊ］．上海畜牧兽医通讯，１９８９，１：３６－４７． 果。 ［３］孔繁瑶，宁长申，殷佩云．１５株柔嫩艾美耳球虫Ｅｉｍｅｒｌａ ｔｅｒｔｄｌａ ３．４由于将球虫疫苗制成了微囊型，可将球虫疫 对五种抗球虫药的抗药性调查研究［Ｊ］．北京农业大学学报， 苗拌料经口免疫，这种免疫方法相对于以前的滴服 １９９４，２１（３）：３０２—３０７． 和饮水免疫有较为明显的优势。滴服免疫法免疫 ［４］刘群，韩谦，蒋金书，等．山东省潍坊地区肉鸡球虫的抗药性 的整齐度最高，即能使１００％鸡只均匀接种，但需逐 调查［Ｊ］．畜牧兽医学报，１９９９，３０（２）：１８７—１９２． ［５］彭新字，，魏文康，等．柔嫩艾美耳球虫野外分离株对３ 只滴服，而且在滴服过程中要不时振荡卵囊悬浮 种化学合成药物的抗药性［Ｊ］．中国兽医学报，２０００，２０（１）： 液，保证苗的均匀度，以使每只鸡接种同样的剂量， ４８—５Ｏ． 故耗时长，在大规模鸡场较难推广施行，且在操作 ［６］陈汉忠，黄宪高，刘杰标，等．几种抗球虫药对鸡球虫病的疗效 过程中对鸡只的应激也是十分严重的；饮水免疫方 试验［Ｊ］．广西农业科学，１９９０，６：４１—４２． 法使用起来似乎非常方便，但只简单地将疫苗卵囊 ［７］Ｃｈａｐｍａｎ ＨＤ．Ｅｉｒｎｅｒｉａ ｔｅｎｅｌｌａ ｉｎ Ｃｈｉｃｋｅｎｓ；Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｒｅｓｉｓｔｎａｃｅ ｔｏ 加入到水中是不行的，因为卵囊密度大很快即沉入 ｔｈｅ Ａｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉｌａ Ｄｒｕｇｓ Ｍｏｎｅｎｓｉｎ ａｎｄ Ｌａｓｌａｃｏｉｄ［Ｊ］．Ｖｅｔ Ｐａｒａｓｉ－ ｔｏｌ，１９７６，２：１８７—１９６． 饮水器的底部，幼雏的喙插入水中仅数毫米的深 ［８］郑诗意．各种抗球虫药之特征及其各种用法之利弊［Ｊ］．养禽 度，结果大部分疫苗不能发挥应有的作用，不能保 病防治，１９９５，４：２８—２９． 证免疫效果；拌料口服免疫法操作起来十分方便， ［９］Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＲＢ，Ｃａｔｃｈｐｏｌｅ Ｊ．Ａ Ｎｅｗ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ａ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅ Ｔｅｓｔ ｔｏ 可以节省大量的时间，而且免疫的整齐度较高，不 Ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ Ｅｆｉｆｃａｃｙ ｏｆ Ｌｉｖｅ Ａｎｔｉｅｏｃｃｉｄｉｌａ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ｆｏｒ Ｃｈｉｃｋｅｎｓ 会对鸡只产生太大的应激，值得在各种规模的鸡场 ［Ｊ］．Ｖａｃｃｉｎｅ，２０００，１８：１１７８—１１８５． ［１Ｏ］角田清．鸡球虫病［Ｍ］．陈谊，明如镜，译．上海：上海文献科 中推广施行。 学技术出版社，１９８６．９１—９２． ［１ １］Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｊ，Ｒｅｉｄ ＷＭ．Ａｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉｌａ Ｄｒｕｇｓ：Ｌｅｓｉｏｎ Ｓｃｏｉｒｎｇ Ｔｅｃｈ－ 参考文献： ｎｉｑｕｅｓ ｉｎ Ｂａｔｔｅｒｙ ａｎｄ Ｆｌｏｏｒｐｅｎ Ｅｘｐｅｒｉｏｍｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］． ［１］Ｂｈｏｇａｌ ＢＳ．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ａ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ａｎｔｉｇｅｎ ａＢ ａ Ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ Ｅｘｐ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，１９７０，２８：３０—３６． Ｐｒｉｍａｒｙ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ Ｅｆｉｆｃａｃｙ ｏｆ Ｏｒａｌ Ａｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉａｌ Ｍｉｃｒｏ．ｖｅｓｉｃｌｅ Ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ Ｃｈｉｃｋｅｎｓ ＣＨＥＮ Ｊｉｎ—ｘｉ，ＣＨＥＮ Ｈａｎ—ｚｈｏｎｇ，ＸＩＥ Ｔｉｎｇ，ＺＨＯＵ Ｔｉａｎ－ｚｈｅｎｇ，ＬＩ Ｆａｎｇ，ＱＩＮ Ｈｕｉ—ｌｉｎｇ，ＬＵ Ｘｉａｏ—ｙａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＡｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３０００４；Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｎｅｗ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ａｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉａｌ ｖａｃｃｉｎｅ ｗａｓ ｔｅｓｔｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｅｆｉｆｃａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉ— ｃｏｃｃｉｄｉｌａ ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏ—ｖｅｓｉｃｌｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｍｉｘｅｄ ｉｎ ｆｅｅｄ ａｎｄ ｏｒａｌｌｙ ｔａｋｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｗｉｔｈ ｔｗｉｃｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｈａｄ ｔｈｅ ｌｏｗｅｒ ｏｆ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ，ｍｏｒｔａｌｉｔｙ， ｓｃｏｒｅ ｏｆ ｌｅｓｉｏｎ，ｓｃｏｒｅ ｏｆ ｄｒｏｐｐｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｅｅｄ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｗｉｔｈ ｏｎｃｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｕｓｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏ—ｖｅｓｉｃｌｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｗａｓ ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ｃｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓ ａｆｔｅｒ ｔｗｉｃｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ： ｍｉｃｒｏ—ｖｅｓｉｃｌｅ；ｖａｃｃｉｎｅ；ｃｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓ；ｅｆｉｆｃａｃｙ 兽药ＧＭＰ合格企业目录（１） 企业名称 检查验收范围 证书编号 状态 有效期 哈尔滨市和平兽药有限公司 大容量注射剂（静脉）／小容量注射剂、口服 （２００６）兽药ＧＭＰ证字１２９号 改扩建 ５年 溶液剂、散剂／粉剂／预混剂
