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【关键字】检验
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
植物及其产品转基因成份检测 抽样和制样方法
修订编制说明
任务来源和工作情况
根据国家认证认可监督管理委员会标准制（修）订计划（编号2010B207），由中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、国家质检总局动植物检疫实验所、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局共同负责中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1194－2003《植物及其产品转基因成份检测 抽样和制样方法》的修订工作。修订该标准是国家转基因重大专项课题《转基因生物抽样和精准检测技术》(课题编号2008ZX08012-001)的研究内容之一。
本标准修订工作组引用和参照了抽样检验国家标准系列中的部分标准、数据的统计处理和解释国家标准系列中的部分标准，系统研究了国内外相关标准和文献，针对性地研究了转基因产品检测的特点，总结SN/T1194－2003标准实施7年来的经验，按GB/T 1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的要求完成了修订工作。 修订本标准的目的和意义
近年来，转基因植物培育取得突破，推出了一批新品种，在改善农作物品质、提高产量方面发挥了巨大作用。然而，人们对转基因产品的安全性存在着很多的争论。欧盟和一些国家相继出台了转基因产品管理法规，我国也实施《农业转基因生物安全管理条例》等管理办法。转基因产品的检测是这些旨在保护生物和生态安全、维护消费者权益、促进贸易和经济健康发展的法规和的基本依据，其标准化将为制订、实施和改进这些法规和提供有力保证。
抽样和制样工作是检测工作的重要部分和基本前提，它的质量决定了检测结果的准确度。如果不能得到具有代表性的样品，无论进行多么细致和精密的检测，其结果都无法表征总体的性质。制订合理和可行的抽样和制样标准以获取具有代表性的样品，对规范转基因产品检测工作，保证检测质量和提高检测结果的可信度具有重要意义。
转基因产品的发展历史较短，许多问题都有待解决，抽样和样品制备方法也是该领域的重要问题。因此，研究和编制本标准对促进转基因产品检测工作的进一步开展具有积极的现实意义。
SN/T1194-2003标准得到了广泛应用，在规范出入境检验检疫工作，辅助我国相关法律法规实施等方面发挥了积极作用。然而，由于欧盟等国家和地区近年不断修改转基因产品限量水平，并考虑到随着科学技术的进步，这些限量水平仍有可能进一步调整，修订原标准以适应这些要求的变化成为当务之急。 本标准的适用范围
考虑到文献[1]中收集到的相当一部分国家的管理性法规中含有对多种植物及其产品贸易中转基因产品含量的要求，结合转基因产品检测水平的实际状况，顾及植物及其产品贸易、消费者维权意识和转基因产品检测工作的发展要求，以转基因限量水平0.1％为基础制订本标准，使其在大部分情况下适合转基因限量水平0.05％时对植物及其产品的取样和制样，并在一定的范围内适合0.001％限量水平。这样，本标准涵盖了目前所有转基因植物及其产品检测的要求。当转基因管理法规和检测水平发生重大改变时，本标准仍存在修订的必要性。 条文说明 定义和术语
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本标准中的定义和术语引用了SN/T0798-1999中的一般术语，尊重该标准中对于粮食、饲料和包装的定义和分类。在转基因产品检测方面，本标准引用了GB/T19495.1-2004中的定义和术语，在抽样和制样方面引用了GB/T19495.7-2004中的定义和术语。上述定义和术语既保留了原标准的延续性，又结合实际对原标准进行了完善。 一般规定
原标准中引用了SN/T 0799-1999中的规定，该标准中没有对生物安全、生态安全等措施进行特别的考虑，在修订版本中加入了这方面的内容。 作批的依据
技术上与原标准相同，针对实践中对标准理解上的分歧，给出了例子以规范分批操作。
国外部分机构采用的最大作批数量与本标准可能不同，例如部分国外标准中以200t为最大作批数量。但是，根据文献[4]中的分级取样原理，这将使得一级取样单元间方差的增大效应与二级取样单元间方差的缩减效应基本抵消，最大作批数量的这种变化对抽样精度并不产生显著的影响，反而提高了制样和检测的成本。而且，根据原标准较长时期的实践，采用500t作为最大作批数量是合适的。因此，本次修订没有对这方面的技术内容进行修改。 抽样地点
本次修订删去了原标准中有关抽样地点的规定，原因如下：
第一、 原标准中仅给出了仓库抽样和口岸抽样两种抽样地点，是不全面的。
第二、 原标准中设定两种抽样地点与贸易和检验检疫行为方式有关，一方面这些行为方式在不断
扩充和发展，另一方面这些行为方式与本标准的技术性关系不大，因此，保留抽样地点的规定是不必要的。
抽样方法
原标准中引用了SN/T0800.1－1999标准中的抽样方法，但该标准中的抽样方法是在比例抽样的理论指导下制定的，具有一定的局限性。
目前，流动抽样（系统取样）法已被公认为偏差小、精度高的抽样方法。本标准建议采用流动抽样法抽样，并给出了抽样的基本操作方法。同时考虑到机械取样设备将在我国植物及其产品生产和贸易中发挥越来越重要的作用，因此在本标准中给出了使用机械取样设备抽样的相关说明。对从货车、船舱、筒仓和货柜等载货容器及在货堆上抽样的方法和从油舱等容器中采取液体样品的方法沿用了植物及其产品检测行业的习惯作法，并增加了尽可能抽取全深度样品的建议。同样，包装货物的抽样方法也沿用了该行业的习惯作法，但增加了在抽样中需要考虑份样量的要求，避免降低抽样方案的统计性能。
本次对抽样方法的修订参照了GB/T19495.7－2004标准中给出的抽样方法，但保留了对繁殖材料可实施其他抽样方法的规定，以便适应繁殖材料抽样中常见的非概率抽样情况。 抽样数量
本次修订时，抽样数量参照使用了GB/T19495.7－2004标准中的规定，并增加了0.001%和0.01%限量水平下的抽样数量。 通常情况下份样数的确定
文献[5]以及上述课题的研究中使用模拟方法（包括实物模拟）在二级取样的前提下研究了在不同转基因含量水平和检验批均匀性下份样数对抽样精度的影响。将该研究结果绘制成图（见图1～图4）。其中，检验批量设计为500t，份样量设计为0.2。
从两图中可以得知，当转基因含量水平从1%变为0.001%时，份样数对抽样精度的影响程度与转基因含量水平基本无关。还可以得知，想要控制抽样精度在20％左右，对均匀批（均匀性>50％）应保证份样数在50以上，对不均匀批（均匀性在15%-50%之间）应保证份样数在100以上，对于极不均匀批（均匀性<15%），根据上述研究结果计算，要将抽样精度控制在20％左右，其份样数将随检验批不均匀性的增加而成倍增加。为追求抽样精度而一味增加份样数显然是不合理的，更是不经济的。从图中可以得知，
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即便均匀性仅有4％的极不均匀检验批，当份样数增加到500个以上时，其抽样精度在60％以下，综合衡量使用方风险和抽样成本，对极不均匀批选择200个以上的份样数是合理的，也是经济的。
图1 在不同均匀性程度下份样数对取样精度的影响(转基因含量水平1%时) 图2 在不同均匀性程度下份样数对取样精度的影响(转基因含量水平0.1%时) 图3 在不同均匀性程度下份样数对取样精度的影响(转基因含量水平0.01%时) 图4 在不同均匀性程度下份样数对取样精度的影响(转基因含量水平0.001%时)
综合以上因素，本标准中规定了对均匀批份样数不小于50个，对不均匀批份样数不小于200个。 通常情况下原始样品中最小颗粒数的确定
根据文献[5]的另一研究结果，当转基因限量水平为1％时，在均匀性只有4％的极不均匀批中采取约350 000个以上的颗粒可保证取样精度在10％以下。据此计算，当均匀性增加到15％左右时，应需要采取约90 000个以上的颗粒可保证相应的取样精度。
文献[6]研究了在不同转基因限量水平下控制使用方风险在20％以下的均匀批和不均匀批的原始样品最小颗粒数，如表1所示。
表1 文献[6]的研究结果
转基因限量 水平,% 0.001 0.01 0.1 0.2 0.5 1 1.5 2 5 10 1000000 100000 50000 20000 10000 6667 5000 2000 1000 原始样品中含有的最小颗粒数 不均匀批 均匀批 3500000 350000 35000 17500 7000 3500 2333 1750 700 350 文献[6]与文献[5]对原始样品中含有的最小颗粒数作出了不同估计，这是因为文献[6]中所考虑的分层误差基于理论推测，与实际情况存在差别。因此，采用文献[5]中给出的结论是适当的。
本标准所采用的分批方法可能使批量接近1000t，与文献[5]的设计模型稍有差别，但并不影响对最小颗粒数的计算，使用相同的计算方法，得到转基因含量水平为1％，均匀性为15％左右时，原始样品中最小颗粒数应在约160 000个以上。对于均匀性>50%的均匀批，经同样计算，原始样品中最小颗粒数应在约56 000个以上。
文献[6]的研究结果表明，原始样品最小颗粒数与转基因限量水平成反比。虽然该文献所考虑的分层误差不适合使用，但这一结论与文献[5]的研究结果是一致的。相应地可计算在不同转基因限量水平下的原始样品中含有的最小颗粒数。考虑到粮谷检验中使用千粒重品质指标的习惯，当不足1000粒时，修约至上一个1000粒。 原始样品最小质量的计算
为使本标准具有可操作性，给出了几种谷物和油料种子的原始样品最小质量的参照值。它是使用这些种子的典型籽粒平均质量与上述原始样品最小颗粒数相乘得到的，在实际抽样操作中可作为参照，同时为计算加工产品的原始样品最小质量奠定基础。 加工产品原始样品最小质量和最小份样数的确定
在加工产品检验中，对转基因限量水平具有特殊的规定方法，即将加工产品换算成相应的原料来计算，因此在本标准中给出了加工产品原始样品最小质量的计算方法。
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与通常情况下最小份样数的确定方法相同，但考虑到加工产品的加工过程中一般会使原料批均匀化，因此在图1～图4中选择均匀性较高（>70%）时的情况，规定最小份样数为20，足以控制取样精度在20％左右。
小批量货物原始样品中最小单位产品数的确定
小批量货物的单位产品数有时无法达到上述原始样品中的最小颗粒数，因此无法使用上述抽样模型。因此，本标准采用了文献[7]国家标准GB/T 132-1991 不合格品率的小批计数抽样检查程序及抽样表和文献[8]行业标准SN/T 0952-2000 进出口商品抽样检验程序 孤立批计数抽样批不合格品率的估计及样本量的选定（适用于批量较大的情形）两标准分别选择了批中单位产品数小于250和大于250时的原始样品中最小单位产品数。
对批量小于250的情况，使用GB/T 132-1991，采用Ac＝0的检验水平，按照转基因限量水平（该标准中的p0）选择原始样品中最小单位产品数为20个，这样可以使使用方风险水平（该标准中的p1）控制在20％以下。批量小于100时，使用方风险将随着抽样比例的增加而缩小，本标准中采用了保守的作法，在这种情况下仍规定样本量为20。
对批量大于250的情况，使用SN/T 0952-2000，按照尽可能降低使用方风险又不显著提高抽样成本的原则，在该标准中对应于不同批量段选定的样本量中选择上限数量作为本标准中的样本量。
虽然单位产品较大的货物具有单位产品间差异较大的特征，可能不符合特定的分布规律。但由于GB/T 132-1991和SN/T 0952-2000两标准中的统计模型并没有对总体特性值分布情况的，因此使用这两个标准所给出的抽样方案同样适用于单位产品较大的货物。 份样量的确定
本标准参照采用了文献[9]国际标准ISO6中规定的确定不同粒度下固体的份样量。 在植物及其产品领域的液体产品一般为加工产品，由于加工过程的均匀化作用，相当于将其原料进行了比较充分的破碎和混合，因此，其品质波动主要取决于层间差异，因此，未给定液体产品的份样量。
单位产品较大时，按照所采用的计数抽样标准，其最小份样是单位产品本身，因此，抽样时不应对这些产品进行分割。 制样方法
缩分级数的设计
照顾到原始样品量较大的情况，为便于制样操作，本标准提供了构成原始样品可选方法，即用经过一定次数分组缩分的缩分样品构成原始样品。该方法参照采用了GB/T 13732-1992中的并合方法。为避免过度缩分而使层间方差显著增大，本标准给出了使用该并合方法得到的原始样品应大于实验室样品量的4倍的要求。
出于同样的考虑，在实验室样品制备方法中给出了实验室样品的最小数量不得低于原始样品最小数量的1/16的要求。 缩分样品留量
使用Gy的方法[10]，设定期望标准差为20％，在转基因限量水平从0.001％～10％的范围内计算不同粒度下的缩分样品最低留量的估计值（见表2）。在该方法中涉及到固体的密度、释放因子、形状因
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子等参数的估计。由于大多数植物和固体植物产品的密度不超过1g/cm,故以1g/cm估计；由于很难得知所有固体的释放因子，在该表中将释放因子设置为最大值1；取常见固体的性状因子0.5作为该参数的估计值。由此，保证计算得到的缩分样品最低留量使其期望标准差不超过20％。
结合转基因产品生产和贸易的实际情况，采用转基因限量水平为0.1％时所计算的最低留量作为本标准中的基本设计依据，并在粒度较小的区域（<10mm）根据转基因检测的实际需要和避免过度缩分的考虑适当增加了最低留量。
表3中给出了在设计的缩分样品最低留量下各转基因限量水平所对应的最高标准差值，当转基因限量水平低于1％时，部分最高标准差值超过20％，如，在低限量水平下增加标准差是可以接受的。
表2 不同粒度下缩分样品最低留量的计算
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95%通过粒度 样品最低 d(mm) 0.5 1 2 5 10 20 22.4 留量(g) 50 100 200 500 1500 10000 15000 0.3 0.7 1.3 3.4 5.5 6.0 5.8 0.5 1.0 2.0 5.0 8.2 8.9 8.7 0.8 1.6 3.2 7.9 0.9 1.8 3.6 9.1 转基因限量水平 10.0% 5.0% 2.0% 1.5% 1.0% 0.5% 0.2% 0.1% 0.01% 0.001% 1.1 2.2 4.5 1.6 3.2 6.3 2.5 5.0 3.5 7.1 11. 22 45 112 183 200 214 35 70 142 354 579 633 677 10.0 14.1 11.2 15.8 25.0 35.4 12.9 14.8 18.3 25.8 40.8 57.7 14.1 16.2 20.0 28.3 44.7 63.2 13.7 15.7 19.4 27.4 43.3 61.2 本标准主要起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。
6 本标准参加起草单位：厦门出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 7 本标准主要起草人：曹际娟、郑江、陈红运、黄新、陈颖、朱水芳。
参考文献
[1] 国外转基因产品管理法规汇编，国家质检总局动植物检疫实验所，深圳出入境检验检疫局编译，2000
年6月
[2] GB/T 13732-1992 粒度均匀散料抽样检验通则
[3] SN/T0800.1-1999 进出口粮食、饲料检验 抽样和制样方法
rd
[4] Cochran, G.W. Sampling Techniques, 3 Edition, J. Wiley & Sons Inc., NY, USA, 1977. [5] Claudia Paoletti, et al, Simulating kernel lot sampling: the effect of heterogeneity on
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[6] Lischer, P.: Sampling Procedures to Determine the Proportion of Genetically Modified Organisms in
Raw Materials, Part II: Sampling from Batches of Grain, 2001, Mitt. Lebensm. Hyg. 92, 305-311. [7] GB/T 132-1991 不合格品率的小批计数抽样检查程序及抽样表
[8] SN/T 0952-2000 进出口商品抽样检验程序 孤立批计数抽样批不合格品率的估计及样本量的选定
（适用于批量较大的情形）
[9] ISO 6, Oilseeds - Reduction of laboratory sample to test sample, International Organization for Standardization, Geneve, Swizerland.
[10] Pierre Gy, Sampling for Analitical Purposes, John Wiley & Sons, 1998.
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