６ 南昌大学学报（医学版）２０１５年第５５卷第３期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｃｈａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）２０１５，Ｖｏ１．５５ Ｎｏ．３ 鸡卵清蛋白食物过敏大鼠 中药口服治疗的实验研究 王俊轶 ，李建杰 ，李国平 ，刘志刚。，刘晓字。 （１．泸州医学院附属医院呼吸内科，四川泸州６４６０００； ２．深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所，广东深圳５１８０６０） 摘要：目的建立鸡卵清蛋白（ＯＶＡ）食物过敏大鼠模型，利用中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３对食物过敏大鼠进行治疗，探 讨其治疗效果及其机制。方法 将２４只ＢＮ大鼠按随机数字表法分为ＰＢＳ对照组、０ＶＡ模型组及中药复方Ｆｏｒ— ｍｕｌａ－３治疗组，每组８只。０ＶＡ模型组与中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗组在前６周和第７、９、１１、１３周分别予ＯＶＡ（１ ｍｇ・ｍＬ ）灌胃致敏，每天１次；于第１３周末以（）ＶＡ（１００ ｍｇ・ｍＩ ）进行激发，建立大鼠ＯＶＡ食物过敏模型。 其中中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗组于第７周开始同时给予１ ｍＬ中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３（１５０ ｍｇ・ｍｌ ＿１）灌胃治疗，每天 １次；０ＶＡ模型组则以１ ｍＬ的０．１ ｍｍｏｌ・Ｌ～ ＰＢＳ灌胃治疗。ＰＢＳ对照组致敏、激发和治疗均予以浓度为 ０．１ ｍｍｏ｜・Ｉ －１的ＰＢＳ １ ｍＬ灌胃。激发２４ ｈ后处死大鼠，测定３组大鼠血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ水平、计算肥大 细胞脱颗粒的百分比、观察肠道组织超微结构病理变化等，对治疗效果进行评价。结果 ＯＶＡ模型组血清中 ＯＶＡ特异性ＩｇＥ抗体显著高于ＰＢＳ对照组、脱颗粒肥大细胞数量显著多于ＰＢＳ对照组（均Ｐ＜０．０１）；中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗组血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ水平显著低于０ＶＡ模型组、肥大细胞脱颗粒显著少于ＯＶＡ模型组（均 Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。ＯＶＡ模型组肠黏膜微绒毛变形，细胞内细胞器损伤，细胞间连接破坏，炎性细胞浸润增多；中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ一３治疗组微绒毛均匀整齐，细胞器基本正常，细胞间连接紧密，与ＯＶＡ模型组相比病变明显轻微。结论 中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３能有效地降低食物过敏大鼠血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ，减少肥大细胞脱颗粒并减轻肠道的病理 改变，对食物过敏有良好的治疗效果。 关键词：食物过敏；鸡卵清蛋白；中药治疗；Ｆｏｒｍｕｌａ一３；超微结构；动物，实验；大鼠 中图分类号：Ｒ３９２．８ 文献标志码：Ａ 文章编号：２０９５—４７２７（２０１５）０３—０００６—０４ ＤＯＩ：１Ｏ．１３７６４／ｉ．ｃｎｋｉ．ｎｃｄｍ．２Ｏ１５．Ｏ３．００２ Ｏｒａｌ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ ｆｏｒ ＯＶＡ・－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｆｏｏｄ Ａｌｌｅｒｇｙ ｉｎ Ｒａｔｓ ＷＡＮＧ Ｊｕｎ—ｙｉ ，ＬＩ Ｊｉａｎ－ｊｉｅ ，ＬＩ Ｇｕｏ－ｐｉｎｇ ，ＬＩＵ Ｚｈｉ—ｇａｎｇ ，ＬＩＵ Ｘｉａｏ－ｙｕ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｉｓｅａｓｅｓ。ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌｕｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ。 Ｌｕｚｈｏｕ ６４６０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｏｆ Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ ５１８０６０，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｏｖａｌｂｕｍｉｎ（ｏＶＡ）一ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ，ａｎｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａ１ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｏｎ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｃｈａ～ ｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｗｅｎｔｙ—ｆｏｕｒ Ｂｒｏｗｎ～Ｎｏｒｗａｙ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ，ｗｉｔｈ ８ ｒａｔｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ．Ｒａｔｓ ｉｎ ＯＶＡ ｍｏｄｅ１ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｔｒｅａｔ－ ｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄ ｂｙ ＯＶＡ ｇａｖａｇｅ １ ｍｇ・ｍＬ ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｆｏｒ ６ ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ ｗｅｅｋｓ ａｎｄ ａｔ ｗｅｅｋｓ ７，９，１１ ａｎｄ １３ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ ｗｉｔｈ ＯＶＡ １００ ｍｇ・ｍＬ一 ａｔ ｔｈｅ ｅｎｄ ｏｆ ｗｅｅｋ １３ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅＩ ｏｆ ＯＶＡ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｒａｔｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ＯＶＡ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｌｌｙ ｇｉｖｅｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ １５０ ｍｇ・ｍＬ ａｎｄ ＰＢＳ ０．１ ｍｍｏｌ・Ｌ～ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ７ｔｈ ｗｅｅｋ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒａｔｓ ｉＤ ＰＢＳ 收稿日期：２０１５－０１－２７ 基金项目：国家自然科学基金（８１２７１９５０、８１４００５９１）；深圳市科技计划项目（ＪＣＹＪ２０１４０４１８０９５７３５５３８） 作者简介：王俊轶（１９８９一），男，硕士研究生，主要从事呼吸与过敏性疾病的研究。 通信作者：刘晓宇，助教，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｘｙ０９０１＠１６３．ｃｏｒｎ。 王俊轶等：鸡卵清蛋白食物过敏大鼠中药口服治疗的实验研究 ７ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｏｎｌｙ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ＰＢＳ ０．１ ｍｍｏｌ・Ｌ～ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｐｅｒｉｏｄ．Ａｌｌ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ ２４ ｈｏｕｒｓ ａｆｔｅｒ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＯＶＡ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＩｇＥ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｆｕｒｔｈｅｒ— ｍｏｒｅ，ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ｄｅｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＯＶＡ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＯＶＡ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＩｇＥ ａｎｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｄｅｇｒａｎｕｌａｔｅｄ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ ｄｅ— ｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＰＢＳ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｂｕｔ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜ ０．０ １）．Ｒａｔｓ ｉｎ ＯＶＡ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｖｉｌｌｕｓ ｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｏｒｇａｎｅｌｌｅ ｉｎｊ ｕｒｙ，ｃｅｌｌ ｊｕｎｃｔｉｏｎ ｄａｍａｇｅ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ａｌｌ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ— ｄｕｃｅｄ ｂｙ ０ＶＡ ｗｅｒｅ ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｂｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｕｎｉｆｏｒｍ ｍｉｃｒｏｖｉｌｌｉ．ｎｏｒｍａｌ ｏｒｇａｎｅｌｌｅｓ ａｎｄ ｔｉｇｈｔ ｃｅｌｌ ｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａ１ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｃａｎ ｒｅｄｕｃｅ ｓｅｒｕｍ ＯＶＡ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＩｇＥ １ｅｖｅｌｓ， ｉｎｈｉｂｉｔ ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ｄｅｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｌｉｅｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一３ ｉＳ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｆｏｒ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ；ｏｖａｌｂｕｍｉｎ；Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ；ｆｏｒｍｕｌａ一３；ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ； ａｎｉｍａｌｓ，１ａｂｏｒａｔｏｒｙ；ｒａｔｓ 过敏性疾病是由过敏原诱发的、ＩｇＥ介导的多 １．２．２ 动物分组及ＯＶＡ诱导食物过敏动物模型 建立 种免疫细胞及因子参与的炎症性疾病，有遗传倾 向［１］。诸多过敏原中，食物过敏原诱发的过敏反应 已成为严重的公共健康问题，其中又以婴幼儿为重， 发病率高达４ ～８ ］。我国重庆地区进行的流 行病学调查发现，婴儿食物过敏的发病率为 ３．５ ～５．２ ［３］将２４只ＢＮ大鼠按随机数字表法分为磷酸盐 缓冲液（ＰＢＳ）对照组、ＯＶＡ模型组及中药复方Ｆｏｒ— ｍｕｌａ一３治疗组，每组８只。ＯＶＡ模型组与中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ一３治疗组在前６周和第７、９、１１、１３周分别 予ＯＶＡ（１ ｍｇ・ｍＬ ）灌胃致敏，每天１次；于第 ｌ３周末以ＯＶＡ（１００ ｍｇ・ｍＬ ）进行激发，建立大鼠 ＯＶＡ食物过敏模型。其中中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ－３治 疗组于第７周开始同时给予１ ｍＬ中药Ｆｏｒｍｕｌａ一３ （１５０ ｍｇ・ｍＬ ）灌胃治疗，每天１次；ＯＶＡ模型组 则以Ｉ ｍＬ的０．１ ｍｍｏｌ・Ｌ ＰＢＳ灌胃治疗＿７Ｊ。ＰＢＳ 对照组致敏、激发和治疗均予以浓度为０．１ ｍｍｏｌ・ Ｌ 的ＰＢＳ １ ｍＬ灌胃。各组激发２４ ｈ后处死大鼠， 进行相关指标检测。 预防食物过敏最有效的手段是避 免接触过敏原，但由于食物包含人体所必需的营养 物质，所以该方法难以实现［４］。 。中药治疗在亚洲已有千年历史，在西方国家也 已作为一种辅助性疗法多年，对过敏性鼻炎、过敏性 哮喘及食物过敏等疾病有很好的’治疗潜力［５－ｓ］。据 统计，目前美国约有３０ 的成年人和６０ 的儿童使 用中药治疗过敏性哮喘ＩＳ］。本研究使用中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗鸡卵清蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）诱导 的ＢＮ大鼠食物过敏模型，观察其治疗效果，从而为 临床中药治疗过敏性疾病提供理论基础。 １．２．３血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ水平测定 将３组大鼠麻醉后眼球取血，室温静置１０ ｒａｉｎ １材料与方法 １．１ 实验动物及主要材料 后离心得到血清。采用ＥＬＩＳＡ法检测血清０ＶＡ 特异性ＩｇＥ抗体水平，具体步骤参照ＥＬＩＳＡ试剂盒 说明书进行。 ＳＰＦ级雌性ＢＮ大鼠２４只，４～５周龄，由北京 １．２．４腹腔灌洗液中脱颗粒肥大细胞计数 眼球取血后，腹腔注入１５ ｍＬ Ｉ）－Ｈａｎｋｓ液，反 维通利华动物技术有限公司提供［合格证号：ＳＣＸＫ （京）２００７－０００１］；Ｆｏｒｍｕｌａ－３（瑞草堂药业有限公司 愉康分店）、ＯＶＡ（美国Ｓｉｇｍａ公司）、ＩｇＥ抗体检测 试剂盒（美国Ｒ＆Ｄ公司Ｃａｔ．＃５５５２４８）。 １．２实验方法 复冲洗收集腹腔灌洗液，吸取上述分离的腹腔灌洗 液２００ Ｌ，滴于载玻片，室温自然风干，滴加甲苯胺 蓝染液２００ Ｌ染色３０ Ｓ，流水冲洗后室温晾干，封 片镜检。光镜下以肥大细胞周围有明显紫色渗出物 为脱颗粒的肥大细胞，随机计数５００个肥大细胞，计 算其中肥大细胞脱颗粒的百分比［８］。 １．２．５ 空肠组织超微结构电镜观察 将３组大鼠空肠组织切成数段，每段约１ ｍｍ， ３％戊二醛固定，再用Ｉ 四氯化锇后固定，经树脂 包埋后行超薄切片，醋酸铀、枸橼酸铅染色，利用透 １．２．１ 中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３的制备 中药方剂：灵芝３０ ｇ，乌梅３０ ｇ，黄连９ ｇ，干姜 ９ ｇ，人参９ ｇ，当归９ ｇ，煎煮２ ｈ，纱布过滤后经滤纸 抽滤，再旋转蒸发浓缩，真空冷冻干燥得到固体粉 末，称重后用ＰＢＳ溶解至１５０ ｍｇ・ｍＬ＿。。 ８ 射电镜（ＪＥＭ一１００ＣＸ）观察并照相 。 １．３统计学方法 应用ＳＰＳＳ１９．０统计学软件对数据进行分析处 理。计量资料用 ±５表示，各均数间两两比较采用 ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２ 结果 ２．１ ３组大鼠血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ抗体水平的 比较 ＯＶＡ模型组血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ抗体显 著高于ＰＢＳ对照组，中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ～３治疗组血 清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ水平显著低于ＯＶＡ模型组 组，均Ｐ＜０．０１。见表１。 表１ ３组大鼠血清ＯＶＡ特异性ｌｇＥ水平的比较 士ｓ ＊Ｐ＜０．０１与ＯＶＡ模型组比较。 ２．２ ３组大鼠腹腔灌洗液脱颗粒肥大细胞百分比 计数的比较 腹腔灌洗液细胞涂片经甲苯胺蓝染色，计数结 果如表２所示：ＯＶＡ模型组与ＰＢＳ对照组比较，脱 颗粒肥大细胞数量明显增加（Ｐ＜０．０１）；中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗组与ｏＶＡ模型组相比较肥大细胞 脱颗粒显著减少（Ｐ％０．０１），脱颗粒程度也明显减 弱。 表２ ３组大鼠腹腔灌洗液中脱颗粒肥大细胞百分比 士 ＊Ｐ＜Ｏ．０１与ＯＶＡ模型组比较。 ２．３ ３组大鼠空肠组织超微结构电镜观察结果 电镜观察空肠组织超微结构病理变化：ＰＢＳ对 照组大鼠肠黏膜表面微绒毛粗细均匀排列整齐（封 三图ｌＡ），细胞问的紧密连接结构完整（封三图 １Ｂ），胞质内细胞器丰富清晰（封三图１Ｃ），无炎症细 胞浸润。ＯＶＡ模型组大鼠肠黏膜表面微绒毛受 损、变形、膨大，细胞间紧密连接破坏（封三图ｌＤ）， 可见细胞内膜包被的椭圆形颗粒，颗粒中含长方形 晶体的嗜酸粒细胞浸润（封三图１Ｅ）；部分细胞可见 线粒体肿胀、裂解（封三图１Ｆ）。中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一 南昌大学学报（医学版）２０１５年６月，第５５卷第３期 ３治疗组大鼠肠黏膜表面微绒毛排列相对整齐，粗 细较均匀，细胞问的紧密连接恢复（封三图１Ｇ），线 粒体肿胀减轻（封三图１Ｈ），细胞内细胞器基本恢 复正常，炎症细胞浸润少见。 ３讨论 食物过敏已成为世界性的公众健康问题，可累 及多个器官和组织，包括皮肤、胃肠道和呼吸道等， 严重时可导致过敏性休克，危及患者生命。通常诱 发食物过敏的主要过敏原有：牛奶、鸡蛋、花生、坚 果、鱼和贝类［１。］。而在婴幼儿期最易诱发食物过敏 的主要过敏原有：牛奶（２．５ ）、鸡蛋（１．３ ）、花生 （０．８ ）、小麦（０．４ ）、大豆（０．４ ）、坚果（０．２ ）、 鱼（０．１ ）、贝类（０．１ ）［ 。目前针对食物过敏最 有效的手段是严格避免接触食物过敏原，但日常生 活中由于食物成分的多样性，这一方法很难实现。 越来越多的证据支持中药可以用来治疗哮喘、 食物过敏及过敏性鼻炎等疾病。Ｌｉ等… 研究发现， 复方Ｆｏｒｍｕｌａ一１（由１１种中药组成：乌梅、灵芝、人 参、当归、黄连、黄柏、干姜、桂枝、川椒、附子、细辛） 灌胃可通过抑制Ｔｈ２反应治疗花生过敏；Ｆｏｒｍｕｌａ一 ２（由９种中药组成：乌梅、灵芝、人参、当归、黄连、黄 柏、干姜、桂枝、川椒）也可消除花生过敏的症状【 Ｉ。 本研究在文献［１１］研究的基础上进行动物实验，选 用乌梅、灵芝、人参、当归、黄连、干姜的热水提取物 组成的复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３治疗，观察中药复方Ｆｏｒｍｕ— ｌａ一３对食物过敏的治疗效果。 大多数食物过敏属于Ｉ型过敏反应。食物过敏 原首次进入机体时，抗原经树突状细胞呈递给抗原 特异性Ｔ淋巴细胞，诱导Ｂ淋巴细胞成熟分泌抗原 特异ＩｇＥ（ｓＩｇＥ），ｓＩｇＥ结合于肥大细胞细胞膜表面 相应ＩｇＥ受体。当过敏原再次进入机体时与ｓｌｇＥ 特异性结合，激活肥大细胞，使其释放脱颗粒如组 胺、细胞因子等炎症介质，从而引起一系列过敏症 状。因此，在过敏反应的治疗中，抑制或中和过多的 ＩｇＥ是一个重要环节。Ｌｅｕｎｇ等＿】。 利用注射人重组 抗ＩｇＥ抗体的方法来治疗过敏性疾病，取得了很好 的效果。本研究结果发现：ＯＶＡ模型组血清中 ０ＶＡ特异性ＩｇＥ抗体显著高于ＰＢＳ组，中药复方 Ｆｏｒｍｕｌａ一３治疗组血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ水平显 著低于（）ＶＡ组（均Ｐ＜０．０１）。说明Ｆｏｒｍｕｌａ一３可 抑制ＩｇＥ的产生。 肥大细胞广泛分布于皮下及多种组织器官，分 泌一系列的炎症介质，参与机体免疫［】 ］。肥大细胞 在Ｉ型过敏反应中扮演重要角色，所以抑制肥大细 胞脱颗粒在治疗过敏反应中是较为常见的一种治疗 方法。在本研究中发现，中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ－３治疗 组腹腔灌洗液中肥大细胞脱颗粒数较ｏＶＡ模型组 王俊轶等：鸡卵清蛋白食物过敏大鼠中药口服治疗的实验研究 ９ 有显著的降低，说明Ｆｏｒｍｕｌａ一３对肥大细胞脱颗粒 有很好的抑制作用。 肠道病理变化方面，通过电镜观察食物过敏大 鼠空肠超微结构发现，ｏＶＡ模型组肠黏膜微绒毛 （３）：４５２—４５７． ［５］Ｌｉ Ｘ Ｍ，Ｂｒｏｗｎ Ｌ．Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｄｉ— ｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ａｌｌｅｒｇｙ［Ｊ］．Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００９，１２３（２）：２９７—３０６． ［６］Ｊｉｎｄａｌ Ｖ，Ｇｅ Ａ，Ｍａｎｓｋｙ Ｐ Ｊ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ：ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｏｎ— ｃｏｌ，２００８，３０（６）：４３卜４４２． 变形，细胞内细胞器损伤，细胞间连接破坏，炎性细 胞浸润增多；而中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３治疗组微绒毛 均匀整齐，细胞器基本正常，细胞间连接紧密，与 ｏＶＡ模型组相比病变明显轻微。说明Ｆｏｒｍｕｌａ一３ 可改善食物过敏导致的肠道病变。 本研究通过建立ｏＶＡ致敏食物过敏大鼠模 型，利用中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３进行治疗，结果发现： ［７］Ｈｕａｎｇ Ｊ，Ｚｈｏｎｇ Ｙ，Ｃａｉ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ｏｒａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｆｏｏｄ ａｌ— ｌｅｒｇｙ ｍｏｄｅｌ ｉｎ Ｂｒｏｗｎ—ＮｏｒｗａＹ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｗｅｉ Ｓｈｅｎｇ Ｙａｎ Ｊｉｕ， ２００９，３８（１）：５７－５９． ［８］杨成彬，闫浩，刘晓宇，等．花生过敏小鼠腹腔肥大细胞ＳＯＣ活 性与ＲＯＳ相关性研究ｒＪ］．江西师范大学学报：自然科学版， ２０１２。３６（１）：２９—３４． Ｆｏｒｍｕｌａ－３可有效地降低血清中ＯＶＡ特异性ＩｇＥ， 抑制肥大细胞脱颗粒，并对肠道的病理变化有明显 的改善。证明中药复方Ｆｏｒｍｕｌａ一３对于食物过敏有 很好的治疗效果，为临床上治疗食物过敏奠定一定 理论基础。 ［９］刘志刚，杨成彬，闫浩，等．Ｂａｌｂ／ｃ小鼠花生过敏模型的建立及 发病机理ＬＪ］．深圳大学学报：理工版，２０１２，２９（２）：１６５—１７０． ［１Ｏ］刘晓宇，李荔，刘志刚．食物过敏原介导食物过敏机制研究进 展［Ｊ］．食品安全质量检测学报，２０１２，３（４）：２３５—２３９． ［１１］Ｌｉ Ｘ Ｍ，Ｚｈａｎｇ Ｔ Ｆ，Ｈｕａｎｇ Ｃ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｆｏｏｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一１（ＦＡＨＦ一１）ｂｌｏｃｋｓ ｐｅａｎｕｔ—ｉｎｄｕｃｅｄ ａｎａｐｈｙｌａｘｉｓ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ［Ｊ］．Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００１，１０８（４）：６３９— 参考文献： ［１］ Ｃｈａｎ Ｔ Ｆ，Ｊｉ Ｋ Ｍ，Ｙｉｍ Ａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｄｒａｆｔ ｇｅｎｏｍｅ，ｔｒａｎｓｃｒｉｐ— ｔｏｍｅ，ａｎｄ ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ ｏｆ ｄｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ ｆａｒｉｎａｅ ｒｅｖｅａｌ ａ ６４６． ［１２］Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ Ｋ，Ｙａｎｇ Ｎ，Ｃｈｅｎ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｉｃａｃｙ，ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍ— ｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂｕｔａｎｏｌ—ｅｘｔｒａｃｔｅｄ Ｆｏｏｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ一２ ｏｎ ｐｅａｎｕｔ ａｎａｐｈｙ１ａｘｉｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ａｌｌｅｒｇｙ，２０１１， ４１（４）：５８２ ５９１． ｂｒｏａｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｄｕｓｔ ｍｉｔｅ ａｌｌｅｒｇｅｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍ ｍｕｎｏｌ，２０１５，１３５（２）：５３９—５４８． ［１３］Ｌｅｕｎｇ Ｄ Ｙ，Ｓａｍｐｓｏｎ Ｈ Ａ，Ｙｕｎｇｉｎｇｅｒ Ｊ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎ— ｔｉ—ＩｇＥ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｅａｎｕｔ ａｌｌｅｒｇｙ［Ｊ］．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ，２００３，３４８（１１）：９８６—９９３． ［２］ Ｊｏｈｎｓ Ｃ Ｂ，Ｓａｖａｇｅ Ｊ Ｈ．Ａｃｅｅｓｓ ｔｏ ｈｅａｌｔｈ ｃａｒｅ ａｎｄ ｆｏｏｄ ｉｎ ｅｈｉｌ ｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ［Ｊ］．Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１４，１３３ （２）：５８２—５８５． ［１４］Ｌｉｕ Ｃ，Ｌｉｕ Ｚ，Ｌｉ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ｄｅ ［３３ 胡燕，黎海芪．０～２４个月儿童食物过敏的流行病学研究［Ｊ］． 中华儿科杂志，２０００，３８（７）：４３１． ［４］ Ｘｕｌｉ Ｗ，Ｗｅｉｙｉ Ｈ，Ｊｉ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ａ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｆａｓｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈ— ｏｄ ｆｏｒ ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ｆｏｏｄｓ：ａ ２－ｓｉｔｅ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉ— ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ Ｒｅｐ，２０１０，３７（４）： １９９３ ２００１． （责任编辑：周丽萍） ｂｏｄｙ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｓｓａｙ［Ｊ］．Ｊ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ，２０１３，７８ （上接第５页） ［３］Ｔｕｒｎｅｒ Ｈ，Ｋｉｎｅｔ Ｊ Ｐ．Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ａｆｆｉｎｉｔｙ ＩｇＥ ｌａ一２ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｕｐ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｇａｍｍａ［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ａｌｌｅｒｇｙ，２００７，３７（６）：８４６—８５５． ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆｃ ｅｐｓｉｌｏｎＲＩ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９９９，４０２（６７６０ Ｓ）：Ｂ２４ Ｂ３Ｏ． ｒ９］Ｌｉ Ｘ Ｍ，Ｂｒｏｗｎ Ｌ．Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｄｉ— ｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ａｌｌｅｒｇｙ［Ｊ］．Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００９，１２３（２）：２９７—３０６． ［４３ Ｓｔａｓｓｅｎ Ｍ，Ｈｔｉｌｔｎｅｒ Ｌ，ＭＯｉｌｅｒ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍ— ｍａｒｉｏｎ［Ｊ］．ＡｒｃｈＩｍｍｕｎｏｌＴｈｅｒ Ｅｘｐ（ｗａｒｓｚ），２００２，５０（３）：１７９— １８５． ［１Ｏ］Ｚｈａｎｇ Ｗｅｎｔｉｎｇ，Ｌｉ Ｑｉｎｇ，Ｚｈｕ Ｍｉｎｇ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｒｅｃｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｄａｔｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ ｉｎ ｒａｔ ｅｘｃｒｅｍｅｎｔ ｓａｍｐｌｅｓ ｂｙ Ｈｉｇｈ－ ［５３ Ｔａｕｒｏｇ Ｊ Ｄ，Ｆｅｗｔｒｅｌｌ Ｃ，Ｂｅｃｋｅｒ Ｅ Ｌ．ＩｇＥ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ ｏｆ ｒａｔ ｂａｓｏｐｈｉｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ：ｌａｃｋ ｏｆ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｓｅｒｉｎｅ ｅｓｔｅｒａｓｅ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ（Ｔｏｋｙ ｏ），２００８，５６（１１）：１５９２ １５９５． ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９７９，１２２（６）：２１５０ ２１５３． ［６２ Ｂｒａｄｄｉｎｇ Ｐ，Ｒｏｂｅｒｔｓ Ｊ Ａ，Ｂｒｉｔｔｅｎ Ｋ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一４，一５， ａｎｄ－６ ａｎｄｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ—ａｌｐｈａ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ ａｓｔｈｍａｔｉｃ ［１１３ Ｆｕｋａｏ Ｔ，Ｔｅｒａｕｃｈｉ Ｙ，Ｋａｄｏｗａｋｉ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ ３ ｋｉｎａｓｅ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｎ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ：ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｆｒｏｍ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｏｕｓｅ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ（Ｂｅｄ），２００３，８１（９）：５２４—５３５． ［１２］Ｈｕａｎｇ Ｆｅｎｇ，Ｙａｍａｋｉ Ｋ，Ｔｏｎｇ Ｘｉａｏｙｕｎ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎ ｔｉｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＲＢＬ－２Ｈ３ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８，８（３）：５０２—５０７． ａｉｒｗａｙｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅｈｕｍａｎ ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ａｓ ａ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，１９９４，１０（５）：４７１— ４８０． ［７３ Ｋａｔｔａｎ Ｊ Ｄ，Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ Ｋ Ｄ，Ｚｏｕ Ｚｈｏｎｇｍｅｉ，ｅｔ ａ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ｈｅｒｂｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｏｏｄ Ａｌｌｅｒｇｙ ［１３］Ｓｉｒａｇａｎｉａｎ Ｒ Ｐ，ｄｅ Ｃａｓｔｒｏ Ｒ Ｏ，Ｂａｒｂｕ Ｅ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ｓｉｇ ｎａｌｉｎｇ：Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ Ｓｙｋ，ｉｔｓ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ Ｈｅｒｂａｌ Ｆｏｒｍｕｌａ－２（ＦＡＨＦ ２）ｏｎ ｐｅａｎｕｔ ａｌｌｅｒｇｙ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｔｈｅｒ Ｒｅｓ， ２００８，２２（５）：６５１—６５９． ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｎｅｗ ｐａｔｈｗａｙ ｐａｒｔｉｃｉｐａｎｔｓ［Ｊ］． ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ，２Ｏ１０，５８４（２４）：４９３３—４９４０． ［８］ Ｑｕ Ｃ，Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ Ｋ，Ｋｏ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ａｆｔｅｒ ａｓ— ｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｐｅａｎｕｔ ａｌｌｅｒｇｙ ｂｙ ｔｈｅ ｆｏｏｄ ａｌｌｅｒｇｙ ｈｅｒｂａｌ ｆｏｒｍｕ （责任编辑：罗芳） 鸡卵清蛋白食物过敏大鼠中药口服治疗的实验研究（ｉｌ 文 第０贝） ‘： 染乜质；Ｋ：细胞梭；ＭＹ：微绒￡；Ｍ：线牲体；ＥＲ：内硬 ，缃胞连接；（ （：：怀状细胞； ｒｊ：紧钎连 接； ：炎癖细胞浸润；ＲＢＣ：红细胞；ｌ，ｙ：溶酶体。 Ａ（：：ＰＢＳ划照组；Ｄ…Ｆ：ＯＶＡ模酬纽；Ｃ １－！：ｆｌ１葑复 ’ＦⅢｒ＇ｎｎ［ａ一３ ｉ－￣ｄ？２ｌｔ １ ３纰久戳夺肠超微坫｝勾病珥ｉ变化 硬膜内灌注甲强龙对急性脊髓损伤大鼠ｓｏＤ和ＭＤＡ的影晌（ｉｔ 义见第３４页） Ａ：刈照组；Ｂ：实验组、 １ 术后１ ｔＪ脊髓标水ＦＩＥ染色 Ａ：列 组；Ｂ：实验组。 ｝享ｆ ２术后７ ｄ脊髓标本ＨＥ染色
