2019精选医学蛋白质化学习题.doc

作业题部分： 一．选择题：

1.下列哪种蛋白质结构成分对280nm波长处光吸收的作用最大？ （ ） ⑴Trp的吲哚环

⑵Tyr的苯酚环 ⑶Phe的苯环

⑷肽键 ⑸Cys的硫原子

2.下列哪种氨基酸可解离侧链的pK值最接近于生理pH？ （ 4 ） ⑴Cys ⑵Glu ⑶Gln ⑷His ⑸Lys

3.茚三酮是以下列哪种方式与氨基酸反应的？ （ 5 ） ⑴脱氢作用

⑵氨基还原作用 ⑶特定肽键的断裂

⑷侧链的裂解 ⑸氧化脱羧脱氨的作用

4.下列哪种氨基酸只有当其前体参入多肽后才能被合成？ （ 3 ）胶原蛋白 ⑴Phe ⑵Lys ⑶Hyp ⑷Glu ⑸Ser

5.用下列哪些实验可检测氨基酸混合物中的酪氨酸？ （ ） ⑴坂口反应 ⑶乙醛酸反应 ⑴双缩脲反应 ⑶紫外吸收 ⑴是具有7个肽键的分子 ⑶对脂类表面有亲和力

⑵福林试剂反应 ⑷米伦反应 ⑵凯氏定氮法 ⑷茚三酮反应

⑵是一个六肽 ⑷可被胰蛋白酶水解

6.用下列方法中测定蛋白质含量，哪一种需要完整的多肽？ （ 1 ）

7.关于Phe-Leu-Ala-Val-Phe-Leu-Lys的叙述哪些是正确的？ （3.5）

⑸是一个碱性多肽，等电点大于pH 8

8.下列哪些蛋白质是结合蛋白？ （ ） ⑴粘蛋白

⑵细胞色素C ⑶血红蛋白

⑷清蛋白 ⑸组蛋白

9.下列关于α-螺旋的叙述中，哪些是正确的？ （ 除3 ） ⑴它是靠分子内氢键来达到稳定的

⑵它是通过最大限度减弱不利的R基相互作用来达到稳定的 ⑶它是借疏水交互作用来达到稳定的

⑷它是存在于某些蛋白质中的二级结构的一种类型 ⑸Pro和Gly可中断α-螺旋

10.下列关于蛋白质结构的叙述哪些是正确的？ （除4） ⑴二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用

⑵带电荷的氨基酸侧链在水中趋向排列在分子的外侧

1

⑶蛋白质的一级结构决定其高级结构

⑷氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部

11.有一糖蛋白，经测定其蛋白氮含量为0.5mol ，那么其粗蛋白含量为多少？（ 1 ） ⑴43.75g ⑵45.g ⑶1.12g ⑷无法计算

12.下列关于血红蛋白的叙述哪些是正确的？ （4.5） ⑴四个血红素都能找到互不依赖的结合氧 ⑵结合氧的百分数对氧分压作图时图象呈双曲线 ⑶O2较CO更易与血红蛋白结合

⑷O2和血红蛋白的结合并不导致血红素铁化合价的改变

⑸酸中毒、提高CO2的水平都会导致Hb与氧亲和力的下降，从而降低DPG水平可提高Hb的氧亲和力

13.生理状态下，血红蛋白与氧可逆结合的铁离子处于什么状态？ （ 1 ） ⑴还原性的二价状态 ⑵氧化性的三价状态

⑶与氧结合时是三价，去氧后成二价 ⑷与氧结合时是二价，去氧后成三价

14.血红蛋白的氧合曲线呈 （ 3 ） ⑴双曲线 ⑵抛物线 ⑶S型曲线 ⑷直线 ⑸钟罩形

15.SDS凝胶电泳测定蛋白质的分子量是根据各种蛋白质 （ 2 ） ⑴在一定pH条件下所带电荷的不同 ⑵分子大小不同

⑶分子极性不同 ⑷溶解度不同

16.下列有关肌红蛋白的叙述，哪些是正确的？ （除4） ⑴肌红蛋白是由一条多肽链和一个血红素连接而成的紧密球状结构 ⑵多肽链含有高比例的α-螺旋构象 ⑶血红素位于二个组氨酸残基之间 ⑷大部分非极性基团位于球状结构的外部 二．填空题：

1.组成蛋白质分子的碱性氨基酸有 、 、和 。酸性氨基酸有 和 。 是带有芳香族侧链的极性氨基酸。 和 是带有芳香族侧链的非极性氨基酸。 是含硫的极性氨基酸。

2.氨基酸在等电点时，主要以 离子形式存在，在pH＞pI的溶液中，大部分以 离子形式存在。在pH＜pI的溶液中，大部分以 离子形式存在。

3.通常可用紫外分光光度计测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的 、 、和 三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。

2

4.脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生 色物质。

5.在一些天然肽中含有 、 和 环状 等特殊结构。这些结构在蛋白质中是不存在的。很可能这些结构上的变化可使这些肽免受蛋白水解酶的作用。

6.常用的拆开蛋白质分子中二硫键的方法有⑴ 还原 法，常用的试剂为 β-巯基乙醇 。 ⑵ 氧化 法，常用的试剂为 过甲酸 或 。

7.Pauling等人提出的蛋白质α-螺旋模型，每圈包含 个氨基酸残基，高度为 ，每个氨基酸残基沿轴上升 ，并沿轴旋转 度。

8.一般来说，球状蛋白质的 疏水 性氨基酸侧链位于分子内部， 亲水 性氨基酸侧链位于分子表面。

9.维持蛋白质构象的化学键有 、 、 、 、 和 。 10.血红蛋白（Hb）与氧结合的过程呈现 正协同 效应，是通过Hb的 别构 现象实现的。 11.当溶液中盐离子强度低时，可增加蛋白质的溶解度，这种现象叫 盐溶 。当溶液中盐离子强度高时，可使蛋白质沉淀，这种现象叫 盐析 。

12.蛋白质受物理化学因素的影响 级结构不变， 改变，物化性质改变， 降低或丧失。

13. α-螺旋结构，每个螺旋圈内包含 个氨基酸残基，两个氨基酸残基轴向间距为 埃，氢键是由每个残基上的N-H与后面 个残基的C=O形成的，氢键近似地与长轴相 。 14.维持蛋白质二级结构的主要作用力是 ；维持蛋白质三级结构的主要作用力是 。 三．是非题：

1.只有在很高或很低pH时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。 错

2.从某些微生物中分离得到的多肽抗菌素为环状肽链，并含有D-型氨基酸。 对 3.具备三级结构的蛋白质就具有生物活性。错

4.两条以上具三级结构的多肽链通过共价键结合成四级结构的蛋白质。错

5.变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的。错

6.蛋白质中所有氨基酸都是左旋的。错

7.除色氨酸因酸处理被破坏外，所有的氨基酸都能用氨基酸自动分析仪确切的加以鉴定。错Asn、Gln

8.构象的改变必需打破共价键，构型的改变则不是。错 9.血红蛋白的血红素辅基处在一个极性的裂隙中。错？

10.用分子筛层析分离蛋白质，分子量最小的先下来，分子量大的后下来。？ 11.天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。错

12.血红蛋白的α-链、β-链和肌红蛋白的肽链在三级结构上很相似，所以它们都有结合氧的能力。血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。错？（为什么更弱） 13.自然界的蛋白质和多肽类物质均由L-型氨基酸组成。错？

14.测定变构酶的分子量可以用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。错？（打开S-S）

3

15.一个化合物如能和茚三酮反应生成紫色，说明此化合物是氨基酸、肽或蛋白质。错 16.双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。错？

17.脯氨酸不能参与α-螺旋，有它时α-螺旋转弯，在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中，每一个转弯处并不一定有脯氨酸，但是每一个脯氨酸却产生一个转弯。对？

18.变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的。错 （氢键断裂、螺旋松散、疏水基团暴露） 四．问答题：

1.下列五种氨基酸：Ser、Arg、Ala、Glu、trp，在pH5.68的缓冲液中进行电泳，其结果如何？（其pI值依次为：5.68；10.75；6.02；3.22；5.）

2.下列试剂常用于蛋白质化学：CNBr；丹磺酰氯；脲；6mol/L HCl；β-巯基乙醇；水合茚三酮；胰蛋白酶；异硫氰酸苯酯；过甲酸；糜蛋白酶。 其中哪一个最适合于完成下列任务？ ⑴测定小肽的氨基酸顺序。Edman PITC

⑵鉴定肽的氨基末端残基（你拿到的那个肽的量不到10-7g） 丹磺酰氯

⑶不含二硫键蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？脲 β-巯基乙醇 ⑷在芳香残基、甲硫氨酸的残基及Lys、Arg的羧基一侧水解肽键。糜蛋白酶 CNBr 胰蛋白酶

3.指出下列氨基酸残基中哪一些可以在生理条件下的典型球蛋白的分子外部找到？为什么？（Glu、Arg、Val、Phe、Ile、Met、Asn、Lys、Ser、Thr）（极性在外）

4.现有一蛋白质混合液含有A、B、C三种蛋白。A：pI=6.5、分子量=50000；B：pI=7.0、分子量=80000；C：pI=7.5、分子量=100000。请用三种不同方法分离，并简要说明分离原理。（电

泳、pI、盐析等）

5.列举三种常用的蛋白质定量法，并简要说明其原理。（凯氏定氮、双缩脲、Folin、紫外吸收） 6.用酸水解一种六肽，定量回收得到Gly及另一种氨基酸。此氨基酸具坂口反应。用胰蛋白酶处理该肽生成的产物，在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点，但是迁移率与未经处理的六肽不同。用胰凝乳蛋白酶水解原来的六肽，生成的产物中有一游离氨基酸并具紫外吸收，试从上述实验结果写出该氨基酸的顺序。（Trp-Gly-Arg-Trp-Gly-Arg）？

7.分析四肽Lys-Gly-Ala-Gly在pH=1.9 ，pH=3.0， pH=6.5， pH=10.0下进行纸电泳时的移动方向。（pKα-NH2=8.5；Pkα-COOH=3；PkLys-R=10.53）pI= 9.51 ？

8.胃液（PH 约为1.5）中的胃蛋白酶的等电点约为1，比其他的蛋白质低得多。什么功能基团必须相对大量存在时才能使胃蛋白酶具有这么低的pI ？哪些氨基酸可作为有这样功能基团的氨基酸？（37个酸性基团，6个碱性基团，Asp、Glu）

9.人的头发每年约长20cm，计算人头发生长时的肽键合成速度（以每秒合成的肽键数计算）。（4.2）

10.已知某蛋白质含Zn为1.168%，分析后确定每分子蛋白含2个Zn原子（MZn=65），假设分子中72%的氨基酸残基形成α-螺旋，其余的均为β-折叠，试计算一分子中它的二级结构的

4

总长度。（一个氨基酸残基的平均分子量为110道尔顿）（20.8nm） ？ 11.一系列突变种HbA分子在pH=8.6下的电泳迁移率图示如下：

－ ＋

在下列突变种血红蛋白中找出位置abcd的对应物：（bcda） ？

HbD（α68） Lys取代Asn HbJ（β69） Asp取代Gly HbN（β95） Glu取代Lys HbC（β6） Lys取代Glu

12.用阳离子交换树脂分离下列氨基酸时，用pH=7.0缓冲液洗脱时，哪种氨基酸先被洗脱下来？（电荷量、极性，正电荷越多越慢）

⑴Asp和Lys ⑵Gly和Leu ⑶Ser和Ala （pI一样，但Ser极性，树脂非极性） 13.比较下列两个多肽之间溶解度的大小： ⑴[Gly]20和[Glu]20在pH=7.0时；

⑵[Ala-Asp-Gly]5和[Asn-Ser-His]5在pH=3.0时。（极性氨基酸多）

14．为什么在球蛋白内部和外部都可发现Gly和Ala？另外，在球蛋白质内部还是外部能找到Cys？说明理由。（侧链小，疏水性弱，不影响溶解）（极性，但-S-S-无极性，故内部）

15．请你设计一个电泳实验，用以确定蛋白质分子链间或链内的二硫键位置。（工具酶为胃蛋白酶，其特点（1）为专一性较低切点多；（2）作用的pH=1.5，有利于防止二硫键发生交换反应。）（对角线电泳）

16. A 、B、C三种不同蛋白质，在pH=7进行电泳，结果如图所示。 － +

B C A 原点

若在pH 7用中性盐沉淀这三种蛋白质，哪种蛋白质首先沉淀？哪种次之？哪种最后？（CBA）

17.凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交连的多聚物作为支持介质。为什么在凝胶过滤时，分子量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快？（分子量小

的蛋白质会进入凝胶分子，被阻）

5

思考题部分：

1.试从含量和生物学功能说明蛋白质在生命活动中的重要性。

2.蛋白质的组成元素有何特点？哪种可看作蛋白质的特征元素？此特征含量在实际上有何用途？

3.蛋白质的基本组成单位是什么？蛋白质经怎样处理才会产生这些基本单位？

4.氨基酸是如何分类的？各类包含哪些氨基酸？这些氨基酸的结构及三字缩写符号如何？ 5.写出α-氨基酸的结构通式，并根据其结构通式说明其结构上的共同特点。 6.氨基酸是否都具有不对称碳原子？都具有旋光性？

7.氨基酸为什么具有两性解离的性质？什么是两性离子？什么是等电点？图示环境pH值与氨基酸所带电荷的关系。

8.氨基酸的等电点和水的中性点pH7.0有何区别？

9.用紫外吸收法测溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？ 10.氨基酸有哪些重要的化学性反应？各有什么用途？

11.何谓肽？肽键？肽单位？氨基酸残基？N-末端？C-末端？寡肽？ 12.将下列氨基酸按符号连接成肽，并命名之。 Met-Gly-Arg-Phe-Thr-Pro-His-Asp-Val-Cys 讨论题部分：

1.GSH是什么？有何功能？

2.何谓蛋白质的一级结构？何谓蛋白质的空间结构？一级结构和空间结构有何关系？它们是靠什么样的键和力建立这些结构的？

3.蛋白质的二级结构有哪些主要类型？扼要说明它们的结构要点。

4.什么叫肽平面？φ、ψ角都分别相等，多肽链构象如何？如果多肽链完全伸展？φ角ψ角值是多少？

5.在肽单元中，哪个是Cα-C键？Cα-N键？各键特点如何？

6.血红蛋白有什么功能？它的四级结构是什么样的？肌红蛋白有四级结构吗？简述其三级结构要点。

7.在pH6.0时，对Gly、Ala、Glu、Lys、Leu和His混合电泳，哪些氨基酸移向正极？哪些移向负极？哪些不移动或接近原点？

8.在pH5.0时，卵清蛋白pI=4.6，β-乳球蛋白pI=5.2，糜蛋白酶原pI=9.1，在电场中向哪个方向移动？

9.计算一个含78个氨基酸的α-螺旋的轴长。

10.蛋白质中氨基酸可分为亲水、疏水二类，试将所有氨基酸归入其中。 11.什么是分子病？镰刀形红细胞贫血病的发病原因是什么？ 12.试述蛋白质水溶液稳定的因素。

13.什么是蛋白质的变性？能使蛋白质变性的因素有哪些？

6

第二章 核 酸

作业题部分： 一．填空：

1.无论DNA还是RNA都是由许许多多（ ）通过（ ）连接而成的。 2.（ ）是RNA中才有的含氮碱基。 3.（ ）是DNA中才有的含氮碱基。 4.核酸的结构单位是（ ）。

5.tRNA上的（ ）可以识别mRNA上的密码子。 6. ( )是分子量最小的一类RNA。 7. DNA中( )与胞嘧啶以1׃1的比例存在。

8. DNA能形成双螺旋的作用力是( )。 9.1953年( )和( )提出DNA的双螺旋结构模型。 10.双螺旋的每一转有( )对核苷酸.每转高度为( )nm.。 11.tRNA的3′一端都含有( )三个核苷酸具有（ ）作用。 12.在左旋DNA中主链呈Ｚ字形左向盘绕.直径约为（ ）埃．螺距（ ）埃。 螺旋的每一转含（ ）个碱基对.整个分子比较细而伸。．

13.Ｔm值常用于DNA的碱基组成分析.在标准条件下(pH7.0 0.165M ⁄L ΝаCl中)(G-C)%=( 14.核酸分子中含有( )和( )所以对波长( )有强烈吸收。 15.一般来说,DNA分子G-C含量高,分子较稳定,同时比重( ),熔解温度( )。 16.DNA变性后,刚性( )粘度( )紫外吸收值( )。

17.核酸研究中,地衣酚(3,5-二羟基甲苯)法常用来测定( ),二苯胺法常用来测定( )。18.核酸中参与氢键形成的重要官能团如嘌呤上的( )基( )基及氧原子,嘧啶 碱上的( )基及氧原子。

19.四种核苷酸在DNA链中排列的可能方式数目极大,例如由100个核苷酸组成的短链就 有( )种不同的排列方式。 二．是非题：

1.核酸的基本组成成分是碱基、戊糖和磷酸。 2.DNA只存在于细胞核的染色体中。 3.DNA是遗传信息的载体。

4.mRNA是转运核糖核酸.tRNA是信使核糖核酸。 5.细胞内RNA含量最大的是rRNA。

6.核苷中碱基和糖的连接一般是C-C连接的糖苷键。 7.核苷是指碱基与戊糖通过糖苷键连接而成的化合物。

8.嘌呤环的第9位氮原子或嘧啶环的第3位氮原子与戊糖第1位碳原子连接形成的化 学键称糖苷键。

7

)。 9.DNA和RNA除了戊糖不同外，其它皆相同。 10.核酸的一级结构就是核酸的种类和排列顺序。

11.DNA的二级结构就是单股多核苷酸链折成双股螺旋上升。 12.DNA中碱基平面与中心轴平行。

13.双链DNA中每条单链的(G+C)%含量与双链的(G+C)%含量相等。 14.核酸链中核苷酸之间的连接是磷酸单脂键。 15.双螺旋中两条链方向相反。

16.DNA二级结构中,相邻碱基对平面间的距离为34Å。 17.氢键是稳定双螺旋结构的主要因素。 18.tRNA的三级结构一般呈倒L型。 19.DNA的变性是不可逆的过程。

20.核酸变性后分子量降低, 紫外吸收值增高。

21.DNA和RNA一样，在1N KOH溶液中不稳定是易被水解。 22.在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先熔解分开形成小泡。

23.不同来源的DNA链,在一定条件下能进行分子杂交是由于它们有共同碱基组成。 24.核酸变性时,紫外吸收值明显增加,称为增色效应。

25.DNA中碱基摩尔比规律仅适用于双链DNA而不适用于单链DNA。 26.DNA的二级结构就是单股多核苷酸链折成双股螺旋上升。 三． 选 择： 1.核酸的基本组成成分是：

a.组蛋白. 磷酸 b.核糖. 磷酸 2.遗传信息的载体是：

a.mRNA b.tRNA. 3.关于核酸正确叙述是： a.基本单位是核苷酸 c.单核苷酸是核苷的磷酸脂 4.关于单核酸，正确的叙述是： a.单核苷酸是由核苷和磷酸组成 5.核酸的基本结构是： a单核苷酸 a.A—T

b.双螺旋结构 c.多核苷酸链

c.A－U

d.三叶草型结构

6.符合碱基配对规律的是：

b.G－C

d.A－G

7.DNA的空间结构有： a.一条多核苷酸链 c.多条多核苷酸链

c.碱基. 戊糖. 磷酸 d.磷酸. 核仁 c.DNA d.SnRNA(小核RNA)

b.DNA中无核糖和胸腺嘧啶

d.以上都不是

b.单核苷酸是由碱基和戊糖组成

c.单核苷酸是组成核酸的基本单位 d.糖苷键连接核苷和磷酸

b.二条或二条以上具有螺旋结构的多核苷的链 d.以上都不是

8

8. 反密码环存在于： a..mRNA

b. tRNA

c.SnRNA

d.rRNA

9.DNA双螺旋具有以下特点：

a.糖和磷酸骨架位于双螺旋内部 b.有两条反向平行的多核苷酸链 c.每三个核苷酸上升一周 d.碱基间以共价键结合 10.下列叙述错误的是：

a.DNA的二级结构为双螺旋结构 b.DNA中有两条互补链 c.RNA中无碱基配对的关系 d.RNA中存有稀有碱基 11.下列叙述正确的是：

a.DNA的结构是双螺旋结构 b.RNA的空间结构是三叶草型 c.反密码存在于RNA中 d.以上都不对 12.在核酸中可形成氢键的碱基对是： a.A-T

b.U-A

c.C-G

d.G-A

13.关于DNA的二级结构正确叙述的是：

a.链状骨架为脱氧核糖与磷酸组成 b.碱基朝向分子内部 c.两条多核苷酸链互相平行 d.两条多核苷酸链走向相反 14.关于RNA二级结构正确叙述的是：

a.有碱基配对的关系 b.多数以双股多核苷酸链的形式存在 c.有的区域可以形成突环 d.互补规律A-T, G-C 15.DNA中的共价键包括下列哪几种键? a.连在脱氧核糖C-1＇上的腺嘌呤→β-糖苷键 b.磷酸→ 脱氧核糖的2＇-OH c.磷酸→ 脱氧核糖的5＇-OH d.以上都不对

16. DNA分子中碱基配对规律正确的是： a.A=T G=T

b.A=T, G=C

c.A+T=G+C

17.关于tRNA二级结构叙述正确的是：

a.tRNA一般由四臂四环组成 b.反密码环上有反密码子 c.具有一个二氢尿嘧啶环,一个TΨC环 d.在分子上含有稀有碱基 18.DNA与RNA的差别是： a..核糖存在于RNA中

b.脱氧核糖存在于DNA中

d.DNA含尿嘧啶,而RNA中含胸腺嘧啶

d.胞嘧啶+鸟嘌呤

c.DNA一般为双链,RNA为单链 a.腺嘌呤+鸟嘌呤 讨论题部分：

1.核酸变性后,有那些性质发生了变化?

9

d.A+G=T+C

19.下列哪些组分的含量高，则双螺旋DNA的熔解温度也增高?

b.胞嘧啶+尿嘧啶 c.腺嘌呤+胸腺嘧啶

2.细胞中有几种重要的RNA?它们的生物学作用如何? 3.DNA和RNA在组成、结构有何差异?

4.DNA双螺旋结构模型的要点、意义和主要成就如何? 5.与其它RNA相比较，tRNA分子结构上有哪些特点? 6.维持DNA双螺旋结构稳定性的主要作用有哪些? 7.下面有三个DNA分子,请判断它们的Tm值的大小：

TTCAAGAGACTT TCAGCAGTTACGT ⑶GGACCTCTCAGG CCTGGAGAGTCC

⑴.请谈一谈这一条上的[T]和[C]的情况。

⑵.互补链的[A]、[G]、[C]、[T]的情况。 思考题部分：

1.下列核酸链的具体结构如何?

(1).pApCpGpU-OH (2).dpGTCCA. (3).AGCUP 2.DNA的变性是可逆的，有三个因素可促进DNA的复性，即

①阳离子的存在。 ②比熔点低的温度。③DNA链的高浓度。这些因素的作用。 3.在一定条件下，双螺旋DNA部分变性，即螺旋只在一定区域解链，你推测解链区的G-C 对多还是A-T对多？为什么？

4.双链DNA的Tm（熔解温度）由下图中的哪一个字母表示？ 5.DNA双螺旋分子中，A与T之间，G与C之间是怎样形成氢键的？ 计算题部分：

1.由结核分枝杆菌提纯出含有15.1%腺嘌呤的DNA样品，其它碱基的百分数是多少？ 2.一个双链DNA分子，它的分子量是3×107 ①计算这个DNA分子的长度。 ②这个DNA分子的体积是多少？

③这个DNA分子含有多少螺圈？（互补成对的脱氧核苷酸的平均分子量约为618） 2.如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA量为6.4×109对核苷酸，计算人体DNA的 总长度为多少公里？这个长度相当于地球与太阳之间的距离（2.2×109公里）的几倍？ 3. 试计算人的一个体细胞有多少基因？假定每个基因有900对碱基，并且1/3的DNA是 “过剩的”，即不编码的话。

⑴AAGTTCTCTGAA ⑵ AGTCGTCAATGCA

8.一个双螺旋DNA分子中有一条链的成分是[A]=0.30 [G]=0.24

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核酸化学第二套习题

作业题部分： 一．选择题：

1.DNA携带生物遗传信息这一事实意味着什么？（3） ⑴碱基的组成不论哪一物种均应相同

⑵病毒的传染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的 ⑶来自同一生物不同组织的DNA，其碱基组成通常应相同 ⑷DNA的碱基组成应随机体年龄及营养状况而变 ⑸DNA以小环结构存在

2.下列核酸变性后的描述，哪一项是错误的？（1.2.3.6.）？ ⑴磷酸二酯键断裂，分子量变小 ⑵同源DNA有较宽的变性范围 ⑶形成三股螺旋 ⑷260nm的紫外吸收值明显增加 ⑸粘度下降 ⑹浮力密度减小

⑺Tm直接随A-T碱基对的含量改变而变化 ⑻碱基之间的氢键被破坏 ⑼生物学功能部分或全部丧失

3.下列关于多尿苷酸的叙述哪些是正确的？（1.2.5） ⑴完全水解时可产生尿嘧啶、核糖和磷酸 ⑵在pH=9时电泳，向正极迁移 ⑶用它本身的碱基对形成一个双螺旋

⑷在双螺旋结构中碱基对形成一个近似平面的结构 ⑸单核苷酸是核苷的磷酸酯 4.核酸的基本结构是：（3）

⑴单核苷酸 ⑵双螺旋结构 ⑶多核苷酸链 ⑷三叶草型结构 5.关于RNA二级结构正确叙述是：（1.2.3.5）？ ⑴有碱基配对的关系 ⑵RNA二级结构中有稀有碱基 ⑶有的区域可以形成突环 ⑷互补规律是A与T、G与C

⑸RNA二级结构是含短的不完全螺旋区的多核苷酸链 6.关于核酸以下叙述正确的是：（1.3） ⑴DNA为白色纤维固体，RNA为白色粉末

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⑵核酸都溶于有机溶剂 ⑶核酸为两性电解质 ⑷核酸对碱不稳定

⑸RNA与苔黑酚试剂产生紫色物质，DNA与二苯胺试剂产生绿色物质，此反应可作为 二者定量的方法。

7.关于cAMP的叙述正确的是：（3） ⑴是AMP的环状多聚体 ⑵含两个磷酸及两个酯键 ⑶是激素发挥作用的第二信使 ⑷为一高能化合物

⑸在所有生物系统化学能的贮藏和利用中起关键作用 8.紫外分光光度法分析核酸是根据：（4） ⑴两性电解质性质 ⑵能发生颜色反应

⑶变性后光吸收值降低 ⑷在260nm处有一最高吸收值 9.DNA分子中的共价键包括：（1.3）

⑴腺嘌呤和脱氧核糖的C-1＇之间的β-糖苷键 ⑵磷酸与脱氧核糖的2＇-OH之间的键 ⑶磷酸与脱氧核糖的5＇-OH之间的键 ⑷磷酸与磷酸之间的键

12.hnRNA是哪种RNA的前体？（3）

⑴tRNA ⑵真核rRNA ⑶真核mRNA ⑷原核rRNA ⑸真核mRNA 10.稳定DNA双螺旋的主要因素是：（3） ⑴氢键 ⑵与Na+、Mg2+离子的结合 ⑶碱基堆积力 ⑷范德华力

11. tRNA连接氨基酸的部位是在：（3）

⑴2＇-OH ⑵3＇-OH ⑶1＇-OH ⑷3＇-P ⑸5＇-P 二．填空题：

1.核酸的特征性元素是 。

2.辅酶NAD+、FAD和NADP+的相同之处是：三者都为 腺苷酸 的衍生物。

3.双螺旋DNA的熔解温度Tm与 G-C含量 、 溶液离子强度 、 pH值 和 变性剂 有关。 4.DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度，可使理化性质发生很大变化，如 粘度下降 和 紫外吸收值增加 ，这种现象叫做 变性 。其原因是由于 双螺旋结构解体 。

12

5.tRNA二级结构呈 。二级结构中最重要的环是 反密码环 ，它可识别 mRNA上的 。三级结构为 型。

6.DNA双螺旋直径为 nm，双螺旋每隔 nm转一圈，约相当于 个核苷酸对，糖和 磷酸位于双螺旋的 侧，碱基位于 侧。

7.因为核酸分子中含有嘌呤碱和 ，而这两种物质均具有 ，故使核酸 对 的波长有紫外吸收作用。

8.DNA二级结构的维持力有 、 和 ，其中主要维持力是 。 9.碱能水解RNA，而不能水解DNA。这是因为 。

10.常用二苯胺来测定 DNA 含量，用苔黑酚来测定 RNA 含量。

11.DNA分子中存在三类核苷酸顺序：高度重复顺序，中度重复顺序和单拷贝顺序。tRNA、 rRNA以及组蛋白等由 编码。而大多数蛋白质由 编码。 12.生物大分子晶体的空间构象可用 X-射线衍射 测定。 三．是非题：

1.在维持DNA双螺旋结构的稳定上以碱基堆积力最为重要。对 2.磷酸葡萄糖和碱基以糖苷键结合形成核苷酸。错 3.核苷酸中的碱基和糖的连接为N-C连接的糖苷键。错

4.双链DNA中每条单链的（G+C）%含量与双链的（G+C）%含量相等。对 5.核酸变性时，紫外吸收值明显增加，称为减色效应。错 6.真核生物基因都含有内含子。错（许多组蛋白.干扰数） 7.核酸变性后，分子量降低，紫外吸收值降低，粘度变小。错 8.每种核酸分子中的核苷酸都有特定的排列顺序，不是随机的。对 9.几乎所有的tRNA的三级结构都为三叶草型结构。错

10.RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。对

11.DNA双螺旋结构中，有氢键连接的碱基对形成一种近似平面的结构。对 12.原核和真核生物染色体都是DNA与组蛋白结合而成的复合体。错 四．写出下列化合物的化学结构式：

1.1-甲基鸟嘌呤核苷酸 2.DUH 3.2＇，3＇-cAMP 4.胞嘧啶核苷-3＇-5＇-腺嘌呤核苷酸 5.ψ 6.ppTpG 讨论题部分：

1.比较DNA与RNA在化学组成上、二级结构上、细胞内分布及种类和生物学功能等方面的异同。

2.DNA双螺旋和球蛋白的三级结构间的共同特点，并讨论其生物学意义。（亲水基在外，次级键

为主要维持高级构象）

3.蛋白质与核酸在紫外吸收值上有何异同？

4.如何利用化学方法区别DNA、RNA？如何从DNA样品中除去RNA杂质？

5.指出从碱基、磷酸、脱氧核糖开始直到形成稳定的DNA双螺旋结构为止，所涉及到的所有

13

的键与作用力，并指出其主要作用。

6.计算一条长度相当于从地球到月球（距离为约32万公里）的DNA双螺旋分子重量（每一

－

千个碱基对重为1×10-10g）（9.41×104g）

7.有两个来自不同细菌的DNA样品，已知它们的A分别占碱基总量的32%和17%，请推算出每一个样品中四种碱基的相对比例。另外，哪种细菌可能是来源于温泉（℃）的噬热菌，所判断的依据是什么？ 思考题部分：

1.下面两种DNA分子，如果发生热变性，哪种分子Tm值高？如果再复性，问哪种分子形成原来DNA结构可能性更大些？为什么？

⑴5＇ATATATATATAT3＇ ⑵5＇TAGGCGATGC3＇

3＇TATATATATATA5＇（复性快） 3＇ATCCGCTACG5＇（与原来可能性大） 2.加入脲试剂至DNA溶液中时，为什么其Tm值降低？

3.某双链DNA溶液至水溶液中加热，然后冷至室温，静置2分钟，问在下列情况下，OD260如何变化？

⑴溶液加热接近该DNA的Tm值 ⑵溶液加热远远超过该DNA的Tm值。

第三章 糖类的结构与功能习题

作业题部分：

1.糖的D-、L-型，α-、β-型是如何区别和如何决定的？试写出β-D核糖和β-D-2脱氧核糖以及β-D葡萄糖和α-D葡萄糖的Fischer和Haworth（透视式）结构式。 2.什么是糖类化合物？糖类化合物是如何分类的？

3.举例说明糖醇、糖醛酸、糖胺是怎样由糖衍生而来的？β-D葡萄糖胺、N-乙酰-D-葡萄糖胺、乙酰胞壁酸、唾液酸的结构如何？ 4.何谓糖苷、配基、非糖体？

5.生物体较重要的寡糖都是什么？寡糖有何生物功能？

6.简述并比较直链淀粉、支链淀粉、糖原、纤维素、半纤维素的分子结构特点及生物功能。 讨论题部分：

1.何谓粘多糖？其有何特点？重要的粘多糖有哪几种？它们的结构何功能如何？ 2.什么叫糖缀合物、蛋白聚糖、肽聚糖、糖脂和脂多糖？ 3.简述细菌多糖－肽聚糖的结构及功能。 思考题部分：

1.说明糖蛋白中糖链的作用（以血型物质为例）。 2.说明甘油醇糖脂的结构特点。

3.N-酰基神经醇糖脂和脂多糖主要存在于细胞的什么部位？其基本结构如何？

14

第四章 脂类与生物膜习题

作业题部分： 一．名词： 单纯脂 皂化 碘值

复合脂 皂化值

油脂 酸败

简单甘油三酯 混合甘油三酯 酸值

必需脂肪酸

乙酰化值 磷脂 非皂化值 卤化 氢化 蜡

二．填空：

1.脂类是由 和 等所组成的酯类及其衍生物。

2.脂类化合物具有以下三个特征：⑴ ⑵ ⑶ 。

3.磷脂是指 ，由于所含醇的不同可分为 和 ，它们的醇类物质分别是 和 。 ４.脂类物质通常可分为 、 5.卵磷脂分子含 、 、 、

、

、

五类。

、和 等基团。

。

6.胡萝卜素属萜类脂质,它是由八个 碳架(单位)构成，中间有连续的共轭双键。 7.含有胆碱的两种常见的磷脂为 和 8.磷酸甘油脂又称为磷脂,它的母体化合物是 ，系由 和 基团结合而成，常见的 磷酸甘油酯有 和 。 三．计算：

1.250mg纯橄榄油样品完全皂化需47.5mgKOH，计算橄榄油中脂酰甘油的平均分子量。 2.上题中橄榄油与碘反应，680mg油刚好吸收碘578mg，试问： ⑴一个三脂酰甘油分子平均有多少个双键？ ⑵该油的碘值是多少?

3.已知一软脂酰二硬酰甘油的分子量为862，计算其皂化值。

4.测得某甘油三脂的皂化价为200，碘价为60，求甘油三酯的平均分子量。 思考题部分：

1.脂类物质是怎样分类的?其物理性质和生物功能如何? 2.植物油和动物油的化学结构及物理性质有何异同?

3.写出磷酸甘油酯的结构通式,比较磷脂酸、卵磷脂、脑磷脂和磷脂酰丝氨酸的结构的异同点。 4.什么是鞘脂类物质?其结构有何特点?举例说明之。 5.何谓生物膜?生物膜中含有哪几类化学物质?各占比例如何? 讨论题部分：

1.构成膜骨架的膜类物质有哪几种,它们的分子结构特点是什么?膜糖类物质有几种,它们在膜上起什么作用? 膜糖类物质是怎样结合到膜上的? 2.生物膜结构的理化模型是什么模型,其要点如何?

3.简述生物膜有哪些功能，这些功能主要取决于膜上的哪类物质?

15

第五章 酶

作业题部分： 一．概念题： 酶

酶转换数

单体酶、寡聚酶、多酶络合物

辅因子 辅酶、辅基 酶的活性部位和必需基团 同工酶 酶的专一性 诱导契合学说 单纯酶、结合酶 分子活化能 酶原 Km值

张力和形变

中间产物学说

邻近定向效应

酶原 酸碱催化 竞争性抑制作用

米氏方程 非竞争性抑制作用

二．按下表实验数据求此酶促反应的Vmax和Km值。

v(μM/分) 0.3×10-5 M 0.5×10-5M 1.0×10-5M 3.0×10-5M 9.0×10-5M 10.4 14.5 22.5 22.5 33.8 40.5 三．当一酶促反应进行的速度为Vmax的80%时，Km与[S]之间有何关系? 四．影响酶促反应速度的因素有哪些?用曲线表示并说明各有什么影响? 思考题部分：

1．以溶菌酶为例说明最适pH对酶催化活性的重要性，为什么在最适pH两边酶活性快速下降？

2．许多酶的pH活性曲线是钟形，各种酶活性的最高点不相同。根据pH-酶活性关系讨论：pH=4.0和11时，酶活性部位有哪些氨基酸残基的侧链解离，才能使酶具有最大的活性？ 3．对于别构酶来说，加入低浓度的竞争性抑制剂是否会引起酶失活，为什么？ 讨论题部分：

1．绝大多数酶溶解在纯水中会失活，为什么？

2．多数酶的稀释液在剧烈震荡时会产生泡沫，此时即使酶的分子量并没有变化，也会导致酶活性降低或丧失，请说明这是为什么？

16

生物化学第六章习题 作业题部分： 一．填充题，共26分

1.有一个四肽，其一级结构为Ser．Tyr．Arg．Met．请写出其结构式 。 2.蛋白质分子的结构靠各种键(或作用力)来维持，其一级结构靠 ,二级结构靠 ，三级结构靠 ，四级结构靠 。

3.由100个氨基酸残基组成的多肽链，如果完全以α-螺旋的形式存在，其长度为 nm。 4.在pH6.0时，将卵清蛋白（pI=4.6），β-乳球蛋白（pI=5.2），α-胰凝乳蛋白酶（pI=8.3），胃蛋白酶（pI=1.0）的混合物进行纸电泳，向负极移动最快的蛋白质是 。 5.如果有重复序列的UCAUCAUCAUCA 作为mRNA,可有 等氨基酸掺入蛋白质；如改用GUAGUAGUAGUA为mRNA，则 等氨基酸可掺入蛋白质。 6.RNA噬菌体R17外壳蛋白质的mRNA，起始部位周围的碱基序列是：

5΄---GAAGCAUGGCUUCUAACUUU---3΄此蛋白质的第一个氨基酸的密码子是 ，在上述序列右端UAA三联体，并不引.起肽链合成的终止，这是因为 。 7.酶分子是与其所催化反应的 在结构上互补的分子。 8.生物工程主要包括 、 、 和 。 9.解释别构酶作用机理的两个重要模型是 和 模型。 10.酶的活性部位包括 和 。 11.天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase）是一个 酶。

12.乙酰辅酶A在代谢中，可由 或 转变生成，又可以转变成 、 或 、 。

13.草酰乙酸在代谢中可由 或 转变生成，又可转变成 或 。 14.目前最常用于凝胶过滤法的凝胶是 。

15.电泳液中,若增加离子强度，则会使蛋白质的电泳迁移率 。 16.电泳迁移率的单位是 。 17.CM Sephadex是 离子交换树脂。

18.对于已知等电点的物质，在高于其等电点的pH时，要使用 离子交换剂进行柱层析。 二．选择题

1.破坏α-螺旋结构的氨基酸残基是：

①val ②pro ③Gly ④Ala 2.在含血红素的蛋白质中，唯一和血红素共价结合的蛋白质是：

①血红蛋白 ② 肌红蛋白 ③ 细胞色素C ④过氧化氢酶。 3.以下哪一种氨基酸的侧链基团的pK值接近生理pH： ①Glu ②Lys ③Cys ④His

4.对一个混合的氨基酸溶液，用下述哪种实验，可以检出其中的酪氨酸？ ①Sakaguchi reaction

17

②Millon reaction

③Xanthoproteic reaction ④Adamkiewicz Hopkins cole reaction 5.tRNA分子必须能：

①识别密码子 ②识别反密码子 ③区别一个氨基酸与另一个氨基酸 ④识别DNA分子 6.下列的哪一些是蛋白质合成的步骤？ ①tRNA结合到30S核糖体亚基上 ②tRNA结合到70S核糖体上

③氨基酸通过氨酰合成酶连到核糖体上 7.活性部位存在于： ①酶分子上 ①和底物结合

②蛋白质分子上 ②降低反应活化能

③底物分子上. ③增加反应自由能

8.酶之所以能加快反应速度是由于： 9.共价调节酶活力的实质是由于： ①酶和底物共价结合 ②酶和产物共价结合

③通过其它酶以共价方式修饰它们的结构，从而调节酶的活性形式与失活形式相互转变。 10.同工酶： ①结构是相同的 11.测定酶活力时：

①温度会影响测定结果 ②温度愈高，酶活力愈大 ③温度愈低，酶活力愈大

12.丙酮酸及α-酮戊二酸脱氢反应中，哪些辅酶是不需要的： ①生物素 ⑤TPP

②硫辛酸 ⑥CoA

③NAD+ ⑦NADP+.

④FAD

②功能是相同的

③都是来自人体同一组织

13.戊糖磷酸循环可使：

①葡萄糖完全氧化成CO2和H2O ②产生NADPH

③产生葡萄糖-1-磷酸，可参加糖原合成 ④产生甘油，可参加脂肪合成 ⑤产生戊糖，可参加核酸的合成。 14.肝糖原可由葡萄糖-6-磷酸在肝脏中生成 ①系降解作用（磷酸化酶）的逆转 ②需要辅酶A参加

18

③需要UDPG参加 ④需要分枝酶参加 ⑤是需能反应

15.假如用14C标记葡萄糖第五个碳原子，则3-磷酸甘油酸中，哪个碳原子将被标记？

14COO- COO- COO-

CHOH 14CHOH CHOH CH2O P CH2O P 14CH2O P ① ② ③ 16.硫酸铵盐析法纯化蛋白质：

①往往用于一系列纯化步骤的早期 ②往往用于一系列纯化步骤的晚期 ③是根据蛋白质的分子量来分离它们的 17.离子交换层析中，洗脱蛋白质常采用：

①梯度洗脱 ②改变温度 ③改变洗脱液的流速 18.使用Sephadex做凝胶过滤实验时：

①必须考虑不同交联度凝胶所允许的最大流体静力压 ②与流体静力压无关 ③压力愈大，分离愈好。 19.常用的蛋白质溶液脱盐方法是：

①离子交换层析 ②凝胶过滤 ③聚丙烯酰胺凝胶电泳 20.在组织培养中，细胞生长最快的时期是：

①平台期 ②对数期 ③早对数期 三.问答题，共56分。

1.有一条肽链，用溴化氰切割后得到三个肽段，它们的顺序分别是：

Asn.Tyr.Gly.Thr.Tyr.Gly.Met Ala.Glu.Arg.Thr.Leu.Asn.Met

Glu.Ala.Val.Gly.Phe.Ser.Asp.Ala.Met

用胰凝乳蛋白酶水解得到的肽段中，有一个肽的顺序已测出为：Gly.Met.Glu.Ala.Val.Gly.Phe还有一个肽的氨基酸组成（5.7NHCl水解）是：Leu.Asp.Met请排出该肽链的一级结构。（10分）

2.用RNaseT1降解tRNA，得到一个长度为13个核苷酸的片段，用RNaseT1完全降解该片段，得到的产物（I）是：(a)ApCpApGp；(b)pGp；(c)ApCpU；(d)ApApUpApGp。用RNaseI完全降解，得到的产物(II)是：(a)ApGpApApUp；(b) pGpApCp；(c)U；(d)ApGpApCp，试写出该片段的碱基序列，并加以解释。

3.比较在染色体复制和转录过程中，引入一个错误碱基的后果。

19

4.给出竞争性抑制、无竞争性抑制和非竞争性抑制作用的双倒数图。

5.碳酸酐酶催化H2O+CO2 ←→ H2CO3，此酶的分子量为30000，现有10ug纯酶，在37˚下一分钟催化0.3gCO2发生水合作用，求此酶的转换数。 讨论题部分：

1.讨论有机含硫化合物在下列生物体系中的存在和意义。（可从以下方面考虑：存在：①氨基酸及蛋白质（酶）；②维生素及辅因子。意义：①蛋白质的结构；②氧化还原反应；③转移反应中分子的“活化”：（a）糖代谢；（b）脂类代谢。）

2.主要的代谢物质存在着不同的合成与分解途径，也就是说合成代谢与分解代谢的途径不是一种简单的可逆反应。请以脂肪酶的合成代谢与分解代谢为例，说明上述基本原理，并讨论上述现象的意义。

3.丙氨酸在肝中，如何生成尿素？指出其中氮所经过的代谢途径。 4.用图解说明葡萄糖-6-磷酸和丙酮酸处于物质代谢中的关键地位。

5.下列每分子底物在细胞匀浆中完全氧化，产生多少分子ATP？（假设酵解、三羧酸循环及氧化磷酸化均正常进行），①丙酮酸；②NADH；③果糖-1，6-二磷酸；④磷酸烯醇式丙酮酸

思考题部分：

1.亲和层析的基本原理是什么？为什么要在载体和配基间加个“手臂”？

2.现有已去除核酸的鼠肝细胞抽提物，从其中提纯一种酶,已知前三步提纯方法依次是：①硫酸铵盐析→②离子交换层析→③凝胶过滤。试问：从①→②及从②→③各需要对样品进行什么处理？

20

生物化学第七章习题

作业题部分： 一．名词解释：

1.转换数(概念及单位) 2.米氏常数 3.反馈抑制 4.别构调节 5.基因表达 6.补救途径 二．选择题

1.如DNA中的TAA突变成TAC,将发生什么结果?

(a) AUU密码子变成AUG密码子,甲硫氨酸代替了异亮氨酸 (b) UUA密码子变成GUA，缬氨酸代替了亮氨酸 (c) 可译框架移动

(d) DNA复制被抑制,发生转录作用

2. 在下列两个DNA分子中,选择解链温度(熔点)较高的一个：

(a) 5′ TTCTCTGAAAG

AAGAGATTTC 3′ (b) 5′ CTCAGGGGACCT GAGTCCCCTGGA 3′

3.假如葡萄糖第五个碳原子标记放射性C14，则3-磷酸甘油中哪个碳原子将被标记? 14COO- COO- COO-

CHOH 14CHOH CHOH CH2O P CH2O P 14CH2O P ① ② ③ 4. 戊糖磷酸循环可使(选择下述正确的情况)：

A.葡萄糖完全氧化成CO2和水 B.产生戊糖参加核酸合成 C.产生NADPH D.产生甘油参加脂肪合成 E.产生葡-1-磷参加糖原合成

5.糖原可由葡萄糖-6-磷酸在肝脏中生成（选择下列正常的情况）： A. 系降解作用（磷酸化酶）的逆转 B.需要分枝酶参加 C.需要辅酶A参加 D.是一需能反应 E.需要UDPG参加

6.指出胞浆脂肪酸生成及线粒体β-氧化的特点：

A. 胞浆饱和脂肪酸生成 B. 胞和脂肪酸β-氧化 (1). 需ACP转移脂酰链 (2). 利用NAD+→NADH (3). 利用丙二酰CoA为主要前体 (4). 能包括18C到24C的脂肪酸

(5). 利用FAD → FADH2 (6). 利用NADPH →NADP (7). 能由柠檬酸激活 (8). 需乙酰CoA参加

根据其特点，将A或B填入各项。

7. 14C标记的丙氨酸在动物组织中氧化后，所得到 14C-CH-COO-的α-酮戊二酸将在哪个碳原子上被标记？

NH3+

8.当C2标记了14C，氨基标记了15N的谷氨酸，在大白鼠肝脏中进行氧化降解时，下述每个化合物中哪个原子将出现14C或15N同位素：

A.尿素 B.琥珀酸 C.精氨酸 D.瓜氨酸 E.鸟氨酸 F.天冬氨酸 9.某一氨基酸，在pH4的溶液里带负电荷，其等电点必需： ⑴大于pH4 ⑵等于pH4 10.抗体是一种：

⑴糖蛋白 ⑵脂蛋白 ⑴125mg ⑵250mg 12.酶分子是于：

⑴底物分子; ⑵活化中间物（过渡态）； ⑶产物； ⑷辅酶，在结构上互补的分子。 13.亲和层析是根据：

⑴酶分子的表面电荷 ⑵酶的最适作用温度 ⑶酶的特定功能 ⑷酶的分子量，来提纯酶的 14.米氏方程是假定：

⑴底物过量 ⑵产物过量 ⑶中间复合物（ES）过量 15.当酶制剂中含有有毒物质时，其酶浓度和反应速度间的作图：

⑴通过原点 ⑵在横轴上从原点右移 ⑶从原点向纵轴移 16.凝胶过滤常用的介质是：

⑴DEAE-Sephadex ⑵Sephadex ⑶CM-Sephade 17.等电聚焦实必需的物质是：

⑴蔗糖 ⑵载体两性电解质 ⑶酸和碱 三．填空题

1.有一肽为： 丝-苏-苯丙-半胱-精-谷-甘-赖-丙

|

s

22

⑶小于pH4 ⑶简单蛋白质

11.测得某一样品中总氮含量为20mg，则该样品中含蛋白质：

⑶100mg

|

s

|

甘-甲硫-半胱-缬-色-半胱-亮-半胱-天冬 ①用胰蛋白酶处理，断裂其中的 键； ②用CNBr处理，断裂其中的 键；

③在生理条件下， 残基带负电荷； ④在280nm处， 残基有光吸收。 2.按规定顺序，写出六大类酶 、 、 、 、 、 。 3.酶的活性部位中， 基团的作用是决定底物专一性；而 基团的作用是决 定反应专一性

4. （一种核苷酸）的结构式是： 5.某蛋白质基因的编码链为：

5＇CTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG

此基因产物的结构应是 。 6.在下列各条中填上合适的化学键：

〔a〕在核苷酸中连接核糖和磷酸的是 键 （b）在两条DNA链间搭桥的是 键

（c）在核苷酸中连接碱基和戊糖的是 键 （d）在RNA中连接核苷酸的是 键

7.含182000个碱基对的双螺旋DNA分子，长度为 ，其螺旋圈数为 。 思考题部分：

1．说明什么是蛋白质（从蛋白质的主要特征加以分析）？

2．说明竞争性抑制作用，反竞争性抑制作用和非竞争性抑制作用的主要区别？ 3．举例说明蛋白质分离、纯化的基本依据？ 4．简述RNA的生物学意义及其生物合成过程。 讨论题部分：

1．试比较葡萄糖丁酸和丙氨酸（包括生成尿素时消耗的ATP）在人肝脏内氧化分解时，每个

碳原子净得的ATP数？

2．图解说明葡萄糖-6-磷酸、丙酮酸、乙酰CoA处于代谢中的关键地位。

3．列表比较糖的无氧酵解与有氧氧化过程（进行的亚细胞部位、进行反应的条件、反应过程、

生理意义、ATP的生成方式等）。

23

生物化学第八章习题

作业题部分： 一．填充题，

1.有一个四肽，其一级结构为Ser．Tyr．Arg．Met．请写出其结构式 。 2.蛋白质分子的结构靠各种键(或作用力)来维持，其一级结构靠 ，二级结构靠 ，三级结构靠 ，四级结构靠 。

3.由100个氨基酸残基组成的多肽链，如果完全以α-螺旋的形式存在，其长度为 nm。 4.在pH6.0时，将卵清蛋白（pI=4.6），β-乳球蛋白（pI=5.2），α-胰凝乳蛋白酶（pI=8.3），胃蛋白酶（pI=1.0）的混合物进行纸电泳，向负极移动最快的蛋白质是 。 5.如果有重复序列的UCAUCAUCAUCA 作为Mrna，可有 等氨基酸掺入蛋白质；如改用GUAGUAGUAGUA为mRNA，则 等氨基酸可掺入蛋白质。 6.RNA噬菌体R17外壳蛋白质的mRNA，起始部位周围的碱基序列是：

5΄---GAAGCAUGGCUUCUAACUUU---3΄，此蛋白质的第一个氨基酸的密码子是 ，在上述序列右端UAA三联体，并不引.起肽链合成的终止，这是因为 。 7.常用同位素标记的 来追踪DNA的复制过程,这是因为 。

8.某双链DNA的分子量为3×107，它的长度应为 ，共含有 圈螺旋。(设每个碱基对的分子量为650)。

9.设有两个DNA短链(a)和(b)，估计(a)的Tm值比(b)的Tm值 ，因为 。 10.酶分子是与其所催化反应的 在结构上互补的分子。 11.生物工程主要包括 、 、 和 。 12.解释别构酶作用机理的两个重要模型是 和 模型。 13.酶的活性部位包括 和 。 14.天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase）是一个 酶。

15.乙酰辅酶A在代谢中，可由 或 转变生成，又可以转变成 、 或 、 。

16.草酰乙酸在代谢中可由 或 转变生成，又可转变成 或 。 17.凝胶过滤法主要是根据蛋白质的 来对它们进行分离的。 18.DEAE-纤维素是用来进行 层析的。 二．选择题：

1.破坏α-螺旋结构的氨基酸残基是：

①val ②pro ③Gly ④Aia 2.在含血红素的蛋白质中，唯一和血红素共价结合的蛋白质是： ①血红蛋白 ② 肌红蛋白 ③ 细胞色素C ④过氧化氢酶 3.以下哪一种氨基酸的侧链基团的pK值接近生理pH： ①Glu ②Lys ③Cys ④His

4.对一个混合的氨基酸溶液，用下述哪种实验，可以检出其中的酪氨酸

24

①Sakaguchi reaction ②Millon reaction

③Xanthoproteic reaction

④Adamkiewicz Hopkins cole reaction 5.tRNA分子必须能：

① 识别密码子 ② 识别反密码子

③区别一个氨基酸与另一个氨基酸 ④ 识别DNA分子

6.下列的哪一些是蛋白质合成的步骤？ ①tRNA结合到30S核糖体亚基上 ②tRNA结合到70S核糖体上

③氨基酸通过氨酰合成酶连到核糖体上 7.活性部位存在于： ①酶分子上 ②蛋白质分子上 ③底物分子上

8.酶之所以能加快反应速度是由于： ①和底物结合 ②降低反应活化能 ③增加反应自由能

9.共价调节酶活力的实质是由于： ①酶和底物共价结合 ②酶和产物共价结合

③通过其它酶以共价方式修饰它们的结构，从而调节酶的活性形式与失活形式相互转变。 10.同工酶：

①结构是相同的 ②功能是相同的 ③都是来自人体同一组织 11.测定酶活力时： ①温度会影响测定结果 ②温度愈高，酶活力愈大； ③温度愈低，酶活力愈大。

12.丙酮酸及α-酮戊二酸脱氢反应中，哪些辅酶是不需要的：

①生物素 ②硫辛酸 ③NAD+ ④FAD ⑤TPP ⑥CoA ⑦NADP+. 13.戊糖磷酸循环可使：

25

①葡萄糖完全氧化成CO2和H2O ②产生NADPH

③产生葡萄糖-1-磷酸，可参加糖原合成 ④产生甘油，可参加脂肪合成 ⑤产生戊糖，可参加核酸的合成

14.肝糖原可由葡萄糖-6-磷酸在肝脏中生成， ①系降解作用（磷酸化酶）的逆转； ②需要辅酶A参加； ③需要UDPG参加；

④需要分枝酶参加； ⑤是需能反应。

15.假如用14C标记葡萄糖第五个碳原子，则3-磷酸甘油酸中，哪个碳原子将被标记？

14COO- COO- COO-

CHOH 14CHOH CHOH CH2O P CH2O P 14CH2O P ① ② ③ 16.硫酸铵盐析法纯化蛋白质： ①往往用于一系列纯化步骤的早期 ②往往用于一系列纯化步骤的晚期 ③是根据蛋白质的分子量来分离它们的 17.在组织培养中，细胞生长最快的时期是：

①平台期 ②对数期 ③早对数期 思考题部分：

1.有一条肽链，用溴化氰切割后得到三个肽段，它们的顺序分别是：

Asn.Tyr.Gly.Thr.Tyr.Gly.Met Ala.Glu.Arg.Thr.Leu.Asn.Met

Glu.Ala.Val.Gly.Phe.Ser.Asp.Ala.Met

用胰凝乳蛋白酶水解得到的肽段中，有一个肽的顺序已测出为：Gly.Met.Glu.Ala.Val.Gly.Phe。还有一个肽的氨基酸组成（5.7NHCl水解）是Leu.Asp.Met请排出该肽链的一级结构。 2.比较在染色体复制和转录过程中，引入一个错误碱基的后果。 3.原核生物与真核生物染色体DNA复制各有何特点?

4.给出竞争性抑制、无竞争性抑制和非竞争性抑制作用的双倒数图。

5.碳酸酐酶催化H2O+CO2 ←→ H2CO3，此酶的分子量为30000，现有10ug纯酶，在37˚下一分钟催化0.3gCO2发生水合作用，求此酶的转换数。

6.讨论有机含硫化合物在下列生物体系中的存在和意义。（可从以下方面考虑：存在①氨基酸

26

及蛋白质（酶）；②维生素及辅因子。意义：①蛋白质的结构；②氧化还原反应；③转移反应中分子的“活化”：（a） .糖代谢；（b）脂类代谢。）

7.主要的代谢物质存在着不同的合成与分解途径，也就是说合成代谢与分解代谢的途径不是一种简单的可逆反应。请以脂肪酶的合成代谢与分解代谢为例，说明上述基本原理，并讨论上述现象的意义。 讨论题部分：

1.丙氨酸在肝中，如何生成尿素？指出其中氮所经过的代谢途径。 2.用图解说明葡萄糖-6-磷酸和丙酮酸处于物质代谢中的关键地位。

3.下列每分子底物在细胞匀浆中完全氧化，产生多少分子ATP？（假设酵解、三羧酸循环及氧化磷酸化均正常进行），①丙酮酸；②NADH；③果糖-1，6-二磷酸；④磷酸烯醇式丙酮酸 4.亲和层析的基本原理是什么？为什么要在载体和配基间加个“手臂”？

生物化学第九章习题 作业题部分： 一．名词解释 1.酶原

2.转换数

3.米氏常数

4.半不连续复制 5.剪切

6.别构酶

7.第二信使

8.解链温度(Tm) 9.受体

10.性核酸内切酶

二．选择题：(选择正确答案,在①②③．．．．．．的左上角打上√)

1.竞争性抑制剂是与： ①酶促反应的底物结合 2.同工酶是一类： ①分子结构相同的酶

②功能相同的酶

③都是来自动物同一组织的酶

3.米氏方程只不过是King－Altman方程中： ①产物浓度[P]→0时

②底物浓度[S]→0时

③[S]极大过量时的一种特殊形式

4.在一个代谢途径中，关键酶往往是催化其一系列反应中的： ①最先一个反应 ③中间的一个反应

5.下列哪个RNA序列为结合在终止密码子5，UAG3，上的tRNA的反密码子? ①TAG

②ATC

③CAT

④GAT ②产生NADPH

6.戊糖磷酸循环可使：

①葡萄糖完全氧化成CO2和H2O

③产生葡萄糖-1-磷酸参加糖原合成 ④产生甘油参加脂肪合成

27

②酶结合

③酶和底物形成的中间复合物

②最后一个反应

⑤产生戊糖参加核酸合成

7.下列关于化学渗透学说的叙述哪些是正确的?

①线粒体电子传递的功能是使质子移位跨过内膜进入线粒体基质 ②线粒体电子传递释放的自由能储存于电化学梯度中 ③线粒体内膜的头部是F0F1ATP酶

④F0F1ATP酶催化ADP及Pi在体内合成ATP ⑤化学渗透偶联生成ATP仅在线粒体中存在 8.在胞浆合成软脂酸时要消耗多少丙二酰单位? ①5

②6

③7

④8

9.分解代谢的功能是： ① 利用多余的ATP ② 提供能量

②提供还原力(如NADPH) ④保持体温

⑤提供低分子化合物为生物合成的前体 10.选出不消耗高能磷酸基的转移步骤： ① 移位作用 三．填空题

1.α-螺旋是蛋白质主链的一种典型结构，每一圈包含 个氨基酸残基，高度为 ，每个氨基酸残基沿轴上升 ，并沿中心轴旋转 度。 2.测定二硫键的位置,用 法。

3.免疫球蛋白是由 种肽链组成的，每条肽链N-端为 区，C-端为 区。 4.谷氨酸的pk1(α－COOH)值为2.19，pK2(γ-COOH)的值为4.25，pk3(NH3＋)值为9.67，其等电点(pI)等于 。

5.酶分子是与其所催化反应的 在结构上互补的分子。 6.解释构酶作用机理的两个重要模型是： 和 模型。 7.酶活性部位包括 和 。

8.三种常见的酶可逆抑制作用是 、 和 。

9.某DNA样品含腺嘌呤28.9摩尔%，假设这种DNA只含有4种主要碱基，那么胸腺嘧啶含量是 摩尔%，鸟嘌呤含量是 摩尔%，胞嘧啶含量 摩尔%。

10.设T2噬菌体DNA双螺旋含有182000个碱基对，T2DNA分子的长度约为182000×0.34(nm)。 思考题部分：

1.试述维系蛋白质空间结构的作用力。

2.有哪些现代生物学新技术可测定蛋白质的分子量？你能就某一种方法举例来简要说明它的原理和测定步骤吗？

3.什么是酶的活性部位？如何用以解释酶作用的高度专一性。

28

②氨基酸活化

④氨酰－tRNA与核糖体活性部位结合

③肽基转移酶催化的反应

4.以磷酸化酶为例，说明共价调节的生物学意义。

5.下列底物在细胞匀浆中完全氧化成CO2和H2O时可产生多少ATP？假设酵解、三羧酸循环及氧化磷酸化均正常进行。 ①6－磷酸果糖

讨论题部分：

1.若将N15标记的铵盐加入肝匀浆中，开始仅有一个N15原子出现在生成的尿素中，而过一些时间

后，2个15N原子均出现在尿素中,这是为什么?

2.从分子水平上说基因是什么?可分成哪几大类?各有什么功能?什么是基因表达?简述基因是如何

表达的?

②乙酰辅酶A ③NADH

④1，6-二磷酸果糖 ⑤3-磷酸甘油醛 ⑥甘油

生物化学第十章习题 作业题部分： 一．填空题：

片段和 片段，叫做 片段。

2.维持蛋白质构象的化学键和力有 。 3.酶的活性部位是由 和 组成。

4.米氏方程只不过是King－Altman方程中，产物浓度趋于 时的一种特殊形式而已。 5.同工酶往往是具有 动力学性质或调节性质，而在结构上有微小差别的一类酶。 6.DNA复制的方向是从 端到 端；RNA生物合成的方向是从 端到 端；蛋白质生物合成的方向是从 端到 端。 7.设合成DNA的结构是GCGCGCGCGCGCGCGC

CGCGCGCGCGCGCGCG

将此DNA溶液加热到80℃时，其粘度大幅度下降的原因是 ；如果该溶液保持在100℃，占优势的结构是 ；如将该溶液保持在100℃，占优胜的结构是 ； 如将上述加热的溶液缓慢冷却至25℃，DNA结构将发生的变化是 。

8.在DNA结构中，连接脱氧核糖和磷酸的是 键，核酸连接碱基和戊糖的是 键。连接核苷酸碱基的是 键；在两条DNA链间搭桥的是 键。 9.设一含4种主要碱基的线形双链DNA分子含750碱基对和21.3%腺嘌呤，其全长为 微米，含鸟嘌呤 %；含腺嘧啶 %；含胞嘧啶 %。

10.在蛋白质生物合成的过程中，核糖体上有两个重要的部位，一个是 部位，其生物功能是 ；另一个是 部位，其生物功能是 。 二．选择题：（在正确的答案前画√） 1.转移RNA有以下性质：

① 长度为150核苷酸左右 ②5＇端常有—CCA序列

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1.免疫球蛋白被木瓜蛋白酶（papain）水解后，形成 个片段。其中 片段，叫做

③较多修饰核苷 ④负责将信使RNA从细胞核转移到胞浆 2.①起始密码子是一种无意义密码子 ②终止密码子是一种无意义密码子

14.戊糖磷酸循环可使：（选择下述正确的情况）

①葡萄糖完全氧化成CO2和水 ②产生NADPH

③产生葡-1-磷参加糖原合成 ④产生甘油参加脂肪合成 ⑤产生戊糖参加核酸合成

15.下列关于化学渗透学说的叙述哪些是正确的?

①线粒体电子传递的功能是使质子移位跨过内膜进入线粒体基质 ②线粒体电子传递释放的自由能储存于电化学梯度中 ③线粒体内膜的头部是F0F1ATP酶

④F0F1ATP酶催化ADP及Pi在体内合成ATP ⑤化学渗透偶联生成ATP仅在线粒体中存在 思考题部分：

1.在豆蔻酸(14C)β-氧化过程中：

A. 活化豆蔻酸生成脂酰辅酶A需几摩尔ATP? B. 需通过几轮β-氧化才能生成7摩尔乙酰辅酶A? C. 生成几摩尔FADH2及NADH?

D. FADH2及NADH进入呼吸链生成几摩尔ATP?消耗几摩尔氧气?

2.试比较葡萄糖丁酸和丙氨酸（包括生成尿素时消耗的ATP）在人肝脏内氧化分解时，每个碳原子净得的ATP数。

3.举例说明酶活力的共价修饰调节。

4.简述酶的四种主要可逆抑制作用的原理及特点。 5.简述RNA的生物合成和加工。

6.用下列那种试剂最适完成以下工作：溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰蛋白酶(trypsin)、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-cl)、6N盐酸、茚三酮、异硫氰酸苯酯、胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin) ①一段小肽的氨基酸排列顺序 ②鉴定小于10-7克肽的N-末端氨基酸

③使没有二硫键的蛋白质可逆变性,如有二硫键应加何种试剂? ④水解由芳香氨基酸羧基形成的肽键 ⑤水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键

⑥水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键 讨论题部分：

假设有1mmol的五肽,酸水解生成2mmol谷氨酸，1mmol赖氨酸，没有能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段，在pH7.0的条件下进行电泳，一个肽段移向阳极，另一个肽段则移向阴极。用FDNB处理胰蛋白酶水解的一个肽段，再用酸水

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解，生成DNP-谷氨酸，用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽，生成两个肽段及游离的谷氨酸。试从上述实验结果，写出该五肽的氨基酸顺序。

生物化学第十一章习题 作业题部分：

一．在下列各组题中的正确答案前画√,错误的答案前画× 1.进行酶活力测定时，

a.底物浓度必须极大于酶浓度 b.酶浓度必须极大于底物浓度 c.与底物浓度无关

2.酶蛋白变性后活性丧失,这是以为： a.酶蛋白被水解成氨基酸 b.酶蛋白的高级结构被破坏 c.失去激活剂

3.选择出包含在丙酮酸脱氢反应中的辅因子

a.磷酸吡哆醛 b.焦磷酸硫胺素 c.硫辛酸 d.FAD e.辅酶A

4.如使15N标记的E.coli在含14N的培养基中生长三代(增加八倍)所提取的DNA应具有下列那种同位素分配?

a b c d e 纯 15N 15N-14N杂交体 纯 14N 1/8 1/8 0 0 0 1/8 0 1/8 2/8 4/8 6/8 7/8 7/8 6/8 4/8 5.选择下列反应中被异构酶、裂解酶或是水解酶催化的反应,并说明催化反应是那种酶? a.蛋白质→氨基酸 b.组氨酸→组胺＋CO2

c.G＋ATP→G-6-P＋ADP d.L-赖氨酸→D-赖氨酸

e.H3CCOCOOH＋2H→H3CCHO＋CO2 二．填空：

1.如以…ACACAC…为模版进行翻译所得到的蛋白质产物应是 。

31

2.细胞色素C含有104个氨基酸，它的基因至少有 μm长(设每个碱基对的平均分子量为650)。

3.含有88个核苷酸残基的tRNA的基因至少有 μm长。

4. 改变多肽的折叠是因为它不是一个真正的氨基酸，在肌红蛋白和血红蛋白多肽中不

是每一个转弯处都有一个 氨酸，但每一个 氨酸产生一个转弯。 5.由B族维生素衍生具有下列功能的辅酶是:(辅酶名称写在后面)

a.两个氢原子的受体或供体 b.和赖氨酰残基形成Schiff碱 c.活性依赖负碳离子

d.携带以共价键连在硫原子上的酰基

6.用 试剂可以切断二硫键，如β-巯基乙醇。 试剂可以防止二硫键的重新生成。 7.在非极性环境中，假定蛋白质如膜蛋白呈折叠状态，则 侧链在表面， 侧链由于内部相互作用呈中性状态。

8.谷胱甘肽的结构式是 。

9.a 、b 、c 为酵解的限速酶。

10.脂肪酸的代谢产物a 、b 、c 三者习惯上称为酮体。 11.如下列三个五肽的混合物： a.Thr-Phe-His-Asp-Met b.Ile-Glu-Asp-Cys-Asp c.Glu-Tyr-AspGlu-Lys

在pH7.5条件下电泳,三个五肽移向阳极的顺序依次是 。

12.有一蛋白质分子量为70Kdal，组成它的氨基酸平均分子量为110dal，如果整个多肽链都呈α-螺旋结构，其分子长度应为 。

13.纯化以DNA作为底物的酶时用 离子交换树脂，这是因为 。 14.在胰凝乳蛋白酶、溶菌酶和羧肽酶A的催化反应中，作为质子供体的氨基酸残基分别为 、 、 。

15.在DNA复制研究领域中，有比较突出贡献的三位科学家是 、 、 。 16.低浓度的竞争性抑制剂对于某些别构酶常常起 作用。

三．某酶的处提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算总蛋白、总活力单位、比活力、纯化倍数、百分含量。

活力(单位/毫升) 6265 20701 纯化步骤 初提取液 第一次硫铵盐析 总蛋白(毫克) 比活力 总体积(毫升) 165 43 纯度 总活力(单位) 产率

蛋白质(毫克蛋白/毫升)

32

17 14 四．用水杨酸盐抑制谷氨酸脱氢酶的催化作用时 1.用作图法分析以下的数据,确定抑制作用的类型(假设水杨酸盐的浓度维持恒定在40mM) 2.计算Km值 3.计算Ki值

[S] Mm 1.5 2.0 3.0 4.0 8.0 16.0 [P]mg/分 没有水杨酸盐 0.21 0.25 0.28 0.33 0.44 0.40 有水杨酸盐 0.08 0.10 0.12 0.13 0.16 0.18 (注:生物专业只做1.2) 五．下表中各酶均参与核酸代谢，请在空格中填入一个合适的答案，使用以下的缩写：DNA，RNA，XTP(代表4种核苷三磷酸化合物的混合物)，dXTP(代表4种脱氧核苷酸的混合物)，Pi(代表无机磷酸)，P～P(代表无机焦磷酸)。

底物 有机产物 无机产物 模板性质（如果有） 引物性质（如果有） DNA 聚合酶 RNA聚合酶 （转录酶） RNA复制酶（依赖RNA的RNA聚合酶） 逆转录酶 多核苷酸磷酸化酶 思考题部分： 1．一个T7噬菌体基因转录的mRNA含有下列碱基序列：

5’-AACUGCACGAGGUAACACAAGAUGGCU-3’

↑

描述当箭头的G被A取代的突变发生时会产生什么后果?遗传密码图附在后面。 2．从下列几方面比较脂肪酸的氧化及合成

a.反应部位 b.酰基载体 c.还原剂及氧化剂 d.合成或降解方向

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e.酶体系的组织

3．在细菌培养基中加入葡萄糖-1-C14保温，并收集下列酵解及三羧酸中间产物。试问每个中

间产物哪个C 原子被C14原子标记(仅考虑C14最初参入这些化合物?

a.1,6 –二磷酸果糖 b.3-磷酸甘油醛 c.乙酰CoA

d.柠檬酸 e.草酰乙酸

4．当下列化合物被细胞匀浆完全氧化成CO2及H2O时各产生多少分子ATP?

a.丙酮酸 b.NADH c.1,6-二磷酸果糖 d.磷酸烯醇式丙酮酸 e.磷酸二羟丙酮

(此题非生化专业考生回答, 生化专业考生不回答)

讨论题部分：

1．已分离纯化的重组DNA片段为10Kbp(千碱基对)长的线形双螺旋分子，用凝胶电泳法分

离它被性内切酶A和B分别或共同水解的产物得到以下片段。 a.单独用A水解得到长度为3.0和7.0Kbp两个片段； b.单独用B水解得到长度为0.5，1.0和8.5Kbp三个片段；

c.用A和B共同水解得到长度为0.5，1.0，2.0和6.5Kbp四个片段。 画出此重组DNA片段的图，表示A和B水解部位的相对位置。

(此题及十一题生化专业考生回答, 非生化专业考生不答)

2．在代谢研究中，经常使用在γ-位用P32标记的高比活ATP(γP32ATP)而γ

用下列组分进行反应制成。

1升50mM pH8.0缓冲液 10 Mm MgCl2

2 Mm 还原剂(抑制-S-S-生成) 0.4 mM 磷酸甘油酸 0.05 mM NAD+ (并非NADH) 0.2 mM (ATP 非放射性.无ADP) 0.4 mg 磷酸甘油醛脱氢酶

0.2 mg 磷酸甘油酸激酶 小量 P32标记的磷酸钠

上述体系保温1小时后，用层析法回收ATP，几乎所有P32均在ATPγ位上，为何上述反应能进行？解释上述各组分的作用.

32

PATP的制备系

34

生物化学第十二章习题 作业题部分： 一.问答题:

1.DNA性内切酶有何特性和重要性?如用EcoRI处理SV40(猴病毒40)后只产生一个双链DNA片段，这说明SV40DNA结构的什么特点?

2.有一个小肽，经酸水解，测定由四个氨基酸组成。用胰酶水解产生两个片段，其中一个片段在280nm有强的紫外吸收，并且pauly反应，坂口反应均为阳性。另一个片段用BrCN处理放出一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色，求此四肽的氨基酸排列。 二.简答题：

1.酵母在含有第一位碳原子标记的葡萄糖培养基中培养，在无氧的状态下产生CO2，问C14是否在CO2中出现，为什么?

2.将肝脏的可溶物质（胞浆）与C14O2及其它脂肪酸合成的必需组分保温，问生成的硬脂酸是否含有C14？为什么？

3.以N15标记的氨基酸注射入大鼠体内时，大鼠排出的尿素分子上哪个N原子上含有N15？为什么？

4.三脂酰基甘油中，三分子20碳脂肪酸，在β-氧化过程中能生成几个乙酰辅酶A、NADH及FADH2?上述生成的乙酰辅酶A通过三羧酸循环氧化能生成NADH、FADH2及GTP几个分子?通过β氧化及三羧酸循环氧化能生成的NADH、FADH2在有氧氧化过程中，能生成多少分子ATP?

5.下述中间产物属于哪个代谢途径?

①精氨琥珀酸 ②β-羟脂酰ACP ③琥珀酰CoA

④7磷酸景天酮糖 ⑤磷酸烯醇式丙酮酸 6.下列生物化学家在生物化学研究中,有何重大贡献?

F. Sanger J. Sumner R. Okagaki

吴 宪 F.Jacob J.Monod 三．填空

1.两条相当伸展的肽链或同一条肽链的两个伸展的片段之间形成氢键的结构单元称为 。

2.谷氨酸的pK1(α-COOH)值为2.19， pK2(γ-COOH)值为4.25， pK3(NH3)值为9.67，其等 电点(pI)等于 。

3.肌球蛋白还具有 酶的活性，所以当释放能量时，就引起了肌肉运动。 4.在五肽H2N-Ala-Ser-Pro-Leu-COOH结构中有 个肽键。 5.茚三酮与羟脯氨酸反应,在纸层析图谱上呈现 色斑点。

6.蛋白质在聚丙烯酰胺电泳中，它的迁移率取决于蛋白质的 。 7.免疫球蛋白是由 种肽键组成的,每条肽链N端为 区，C端为 区。

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8.在[S]使酶饱和，温度为30℃，pH为最适条件，每分钟转化1摩尔底物的酶量叫 。 9.当NAD+还原成NADH时，在 nm处有一吸收高峰。 10.Km在 条件下，可以看作KS，用来衡量酶和底物的亲和力。 11.在分离纯化酶的过程中用 计算酶被纯化的倍数。 12.谷丙转氨酶催化 谷氨酸-丙酮酸 ←→α-酮戊二酸+丙氨酸 那么，该酶催化的反应机制是 。

13.三肽丝-酪-丝的mRNA的碱基顺序为 ，此mRNA的DNA编码链的碱基顺序为 ，DNA不编码链的碱基顺序为 。(Ser的遗传密码子为ACU，Tyr的遗传密码子为DAC)。

14.从烟叶得到的纯DNA样品含20摩尔%胞嘧啶.假设这种DNA只含有4种主要碱基，那么它的腺嘌呤含量应是 摩尔%。

15.设T2噬菌体双链DNA含有182.000个碱基对， T2DNA的分子长度约为 。 16.腺苷三磷酸的结构式为： 。 四．是非题:

1.血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体，前者是典型的别构蛋白,因而与氧结合过程中呈现协同效应，而后者不是。

2.测定焦谷氨酸、组氨酸、和脯氨酰胺的游离氨基和羧基时均呈阴性反应。 3.蛋白质的氨基酸顺序在很大程度上决定蛋白质的三维构象。

4.在某种蛋白质分子中,当所含酸性氨基酸和碱性氨基酸数目相等时，此蛋白质的等电点pH值为7。

5.氨基酸和蛋白质都是两性电解质，因此它们的溶液能起到缓冲剂的作用，尤其在它们的pI值时，才能发挥最大的缓冲作用。 五．选择题：

1.用来表示酶催化效率的酶促反应速度常数是 。 ①k+1

②k-1

③k+2 ③水解酶 ⑥合成酶 ③羧肽酶A ③胰蛋白酶

④k--1/ k+1

2.醛缩酶在分类时属于六大类酶中的 。 ①氧化还原酶 ④裂解酶 ①溶菌酶

②转移酶 ⑤异构酶

3. 通过电荷转接系统行使催化作用。

②胰凝乳蛋白酶 ②核糖核酸酶

4.消化系统的蛋白水解酶大多数是以非活性酶原的形式合成出来的，但也有例外如 。 ①胃蛋白酶

5.对某一酶促反应，当非竞争性抑制剂存在时和没有抑制剂存在时，其1/v对1/[S]作图所得直线彼此 。 ①平行

②在纵轴上交于一点 ③在横轴上交于一点

6.维持蛋白质二级结构的键主要是 。

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①盐键 ②二硫键 ③氢键 ④疏水键 7.免疫球蛋白是一种 。

①铜蛋白 ②铁蛋白 ③核蛋白 ④糖蛋白 8.在pH5.0时,带负电荷的氨基酸有 。

①精氨酸 ②亮氨酸 ③天冬氨酸 ④酪氨酸 9.蛋白质结构成分中,引起280nm光吸收的最主要原因是 。 ①肽键 ②Met的硫原子 ③Tyr的酚环 ④Phe的苯环 10.在球状蛋白质的分子表面,多数侧链都是 基团。

①带正电荷 ②带负电荷 ③极性 ④非极性 11.三羧酸循环(下列情况何者正确请在括号上画圈) ①全部是可逆的 ②净反应是乙酰基转变成二分子CO2 ③与乙醛酸循环共具一些反应 ④分布于细胞核内

12.戊糖磷酸途径(下列情况何者正确请在括号上画圈) ①在线粒体浆外产生还原力 ②六碳糖转变成戊糖. ③从脂肪酸合成糖

13.下列各种情况何者正确请在标号上画圈 ①谷氨酸脱氢酶催化的反应是可逆的 ②α-酮戊二酸是天冬氨酸的前体 ③L-谷氨酰胺合成需要ATP ③ 酮酸脱氢酶是通过共价修饰调节 思考题部分：

1.请画出别构酶的S形曲线，有正效应物和负效应物存在时的曲线，并加以简要说明。 2.介绍一种测定米氏常数的做图方法，并加以简要讨论。

3.什么叫转录后加工? 是否所有染色体DNA的转录产物都需要加工? 概述真核生物mRNA前体的加工过程。 讨论题部分：

取0.5g蛋白酶制剂配成50ml酶液，从中取出1ml稀释至20ml待用。

取上述稀释液1ml加入1ml酪蛋白，在30℃水浴中进行反应，作用10分钟时，立即加入2ml三氯乙酸，终止酶作用后，过滤反应液，取1ml滤液与斐林试剂作用，产生兰色，经比色测知含有45μg酪氨酸。另取上述稀释酶液1ml，测得蛋白氮为0.1mg。(酶活力单位规定为30℃，pH7.0条件下，每分钟分解底物酪蛋白产生1μg酪氨酸的酶量为一个活力单位)。

求：①每克酶制剂的活力单位数。 ②比活力。

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生物化学第十三章习题

作业题部分： 一．问答题

1.试简要讨论酶活力的共价修饰调节。

2.肝脏组织内的核苷二磷酸激酶催化下列反应：

ATP+GDP←→ADP+GTP

已知此反应的表观米氏常数近于1,它们在细胞内的浓度如下： 代谢物 肝脏中的浓度(M) ATP 2.36×10-3 ADP 0.97×10-3 GTP 0.63×10-3 GDP 0.21×10-3

试问这个酶在体内所催化的反应是否为限速反应? 解释之。

3.请画出别构酶的S形曲线，有正效应物和负效应物存在时的曲线，并加以简要说明。 4.介绍一种测定米氏常数的做图方法,并加以简要讨论。

5.Lys、Arg、Asp、Glu、Ala混合物在低pH值下，加到离子交换树脂上，预测在用连续递增的pH溶液洗脱时，这些氨基酸的洗脱顺序如何?

6.在0.05MKCl溶液中，含有0.01MK2HPO4和0.01MKH2PO4，求此溶液的离子强度? 7.什么叫转录后加工? 是否所有染色体DNA的转录产物都需要加工? 概述真核生物mRNA前体的加工过程。

8.要求画出一均匀小DNA分子具有EcoRI.HpaⅡ和HindⅢ识别位点的图。用多种酶和所有可能组合的混合物来切割样品，并确定所产生片段的大小，得到下表所列数据，画出图，此DNA样品为线形分子还是环形分子?

酶 EcoRⅠ HpaⅡ HindⅢ EcoRⅠ+ HpaⅡ 片段大小 1.3 2.6 2.6 0.5 0.8 1.3 0.6 0.1 1.3 1.2 1.4 0.5 0.6 EcoRⅠ+ HindⅢ HpaⅡ+ HindⅢ EcoRⅠ+ HpaⅡ+HindⅢ 38

0.7 0.8 9.试述放射免疫法的原理，并举例简述其操作过程。 10.请设计从鼠肝分离纯化某酶的实验方案。

11.有哪些现代生物学技术可以测定蛋白质的分子量?你能就某一种方法举例来扼要说明它的原理和测定步骤吗? 二．简答题：

1.酵母在含有第一位碳原子标记的葡萄糖培养基中培养，在无氧的状态下产生CO2， 问C14是否在CO2中出现,为什么?

2.将肝脏的可溶物质（胞浆）与C14O2及其它脂肪酸合成的必需组分保温，问生成的硬脂酸是否含有C14？为什么？

3.以N15标记的氨基酸注射入大鼠体内时。大鼠排出的尿素分子上。哪个N原子上含有N15？为什么？

4.三脂酰基甘油中，三分子20碳脂肪酸，在β-氧化过程中能生成几个乙酰辅酶A、NADH及FADH2?上述生成的乙酰辅酶A通过三羧酸循环氧化能生成NADH、FADH2及GTP几个分子?通过β氧化及三羧酸循环氧化能生成的NADH、FADH2在有氧氧化过程中，能生成多少分子ATP?

5.下述中间产物属于哪个代谢途径?

①精氨琥珀酸 ②β-羟脂酰ACP ③琥珀酰CoA

④7磷酸景天酮糖 ⑤磷酸烯醇式丙酮酸 6.下列生物化学家在生物化学研究中,有何重大贡献?

F. Sanger J. Sumner R. Okagaki

吴 宪 F.Jacob J.Monod

三． 填空：

1.两条相当伸展的肽链或同一条肽链的两个伸展的片段之间形成氢键的结构单元称为 。

2.谷氨酸的pK1(α-COOH)值为2.19， pK2(γ-COOH)值为4.25， pK3(NH3)值为9.67，其等电点(pI)等于 。

3.肌球蛋白还具有 酶的活性，所以当释放能量时，就引起了肌肉运动。 4.在五肽H2N-Ala-Ser-Pro-Leu-COOH结构中有 个肽键。 5.茚三酮与羟脯氨酸反应，在纸层析图谱上呈现 色斑点。

6.蛋白质在聚丙烯酰胺电泳中，它的迁移率取决于蛋白质的 。 7.在[S]使酶饱和,温度为30℃，pH为最适条件，每分钟转化1摩尔底物的酶量叫 。 8.当NAD+还原成NADH时，在 nm处有一吸收高峰。 9.Km在 条件下，可以看作KS，用来衡量酶和底物的亲和力。 10.在分离纯化酶的过程中用 计算酶被纯化的倍数。

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11.谷丙转氨酶催化 谷氨酸-丙酮酸 ←→α-酮戊二酸+丙氨酸那么，该酶催化的反应机制是 。

12.三肽丝-酪-丝的mRNA的碱基顺序为 ，此mRNA的DNA编码链的碱基顺序为 。DNA不编码链的碱基顺序为 。(Ser的遗传密码子为ACU，Tyr的遗传密码子为UAC)。

13.从烟叶得到的纯DNA样品含20摩尔%胞嘧啶。假设这种DNA只含有4种主要碱基，那么它的腺嘌呤含量应是 摩尔%。

14.设T2噬菌体双链DNA含有182.000个碱基对，T2DNA的分子长度约为 。 15.腺苷三磷酸的结构式为： 。

四．是非题: (是在括号前画√,非画×)

1.血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体，前者是典型的别构蛋白，因而与氧结合过程中呈现协同效应，而后者不是。

2.测定焦谷氨酸、组氨酸、和脯氨酰胺的游离氨基和羧基时均呈阴性反应。 3.蛋白质的氨基酸顺序在很大程度上决定蛋白质的三维构象。

4.在某种蛋白质分子中，当所含酸性氨基酸和碱性氨基酸数目相等时，此蛋白质的等电点pH值为7。

5.氨基酸和蛋白质都是两性电解质，因此它们的溶液能起到缓冲剂的作用，尤其在它们的pI值时，才能发挥最大的缓冲作用。 五．选择题：

1.用来表示酶催化效率的酶促反应速度常数是 。 ①k+1

②k-1

③k+2

④k--1/ k+1

2.醛缩酶在分类时属于六大类酶中的 。 ①氧化还原酶 ④裂解酶 ①溶菌酶

②转移酶

③水解酶

⑥合成酶

⑤异构酶

3. 通过电荷转接系统行使催化作用。

②胰凝乳蛋白酶

③羧肽酶A

4.消化系统的蛋白水解酶大多数是以非活性酶原的形式合成出来的，但也有例外如 。 ①胃蛋白酶

②核糖核酸酶

③胰蛋白酶

5.对某一酶促反应,当非竞争性抑制剂存在时和没有抑制剂存在时，其1/v对1/[S]作图所得直线彼此 。 ①平行

②在纵轴上交于一点 ③在横轴上交于一点

6.维持蛋白质二级结构的键主要是 。

①盐键 ②二硫键 ③氢键 ④疏水 7.免疫球蛋白是一种 。

①铜蛋白 ②铁蛋白 ③核蛋白 ④糖蛋白

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8.在pH5.0时,带负电荷的氨基酸有 。

①精氨酸 ②亮氨酸 ③天冬氨酸 ④酪氨酸 9.蛋白质结构成分中，引起280nm光吸收的最主要原因是 。 ①肽键 ②Met的硫原子 ③Tyr的酚环 ④Phe的苯环 10.在球状蛋白质的分子表面，多数侧链都是 基团。 ①带正电荷 ②带负电荷 ③极性 ④非极性 11.三羧酸循环(下列情况何者正确请在括号上画圈) ① 部是可逆的 ② 净反应是乙酰基转变成二分子CO2 ③ 与乙醛酸循环共具一些反应. ④ 分布于细胞核内

12.戊糖磷酸途径(下列情况何者正确请在括号上画圈) ①在线粒体浆外产生还原力 ②六碳糖转变成戊糖. ③从脂肪酸合成糖

13.下列各种情况何者正确请在标号上画圈 ①谷氨酸脱氢酶催化的反应是可逆的 ②α-酮戊二酸是天冬氨酸的前体 ③L-谷氨酰胺合成需要ATP ④丙酮酸脱氢酶是通过共价修饰调节 思考题部分：

1.解释下列名词并举例： 糖苷键

别构酶 烯醇化酶

RNA聚合酶 米氏常数

复合酶系

2.有两种提纯的DNA样品，经分析其中胞嘧啶分别为16.2%与14.5%，问两种DNA中其它碱基的百分数是多少？哪种DNA的Tm值高？试说明原因？加入尿素后又有何现象？ 3.用14C标记葡萄糖中的C，在红细胞内能否产生14CO2？并说明之。 4.说明蛋白质和核酸之间的关系。

5.试述乙酰辅酶A在机体新陈代谢中的重要性。 6.回答下列问题：

⑴在生物体内由甘氨酸、丙氨酸、天冬氨酸形成甘-丙-天三肽，需能多少？（ATP） ⑵酶的最适pH与pI有何不同？ ⑶酶与维生素有哪些关系？

⑷下列4种五肽，在pH7.4缓冲液中电泳，它们各向哪极移动，并说明其前后顺序。

Lys.Gly.Arg.Tyr.His Lys.Gly.Ser.Tyr.His

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Asp.Gly.Ser.Tyr.Glu Ala.Gly.Ser.Tyr.Thr

7.列举实验室常用的测定蛋白质含量的三种方法，并加以评论比较。 1.胰岛素是具有二条多肽链的蛋白质，它是在核糖体上直接合成的。 2.tRNA能运输氨基酸，是因为它有反密码环可与DNA上的密码相配对。 3.谷丙转氨酶只能催化谷氨酸和丙酮酸的转氨基反应。

4.体内甲硫氨酸是由同型半胱氨酸经甲基转移后生成的。因此，它是非必需氨基酸。 5.RNA聚合酶只对RNA的生物合成有作用。

6.温度对酶促反应的影响是：温度升高，反应速度加快；温度降低，反应速度减慢。 7.肌糖原和肝糖原是机体糖的储存形式，它们可分解为葡萄糖入血，供其它组织氧化。 8.脂肪酸进行β-氧化时，首先在脂肪酸的α与β碳原子脱氢，生成烯脂酸，灾继续加水脱氢。 9.有机磷农药中毒引起肌肉痉挛等症状是因为药物抑制了胆碱酯酶的活性而引起。 10.焦磷酸硫胺素只能作为丙酮酸脱氢酶系的辅酶。 二．选择题：

1.蛋白质分子中最基本的化学键是 。

⑴二硫键 ⑵肽键 ⑶氢键 ⑷酯键 ⑸盐键 2.下列 氨基酸为碱性氨基酸。

⑴天冬 ⑵甘 ⑶苯丙 ⑷组 ⑸苏 3.组成DNA的碱基与RNA的碱基不同，其不同成分是含 。 ⑴ ⑵ ⑶ ⑷ ⑸ 4.下列 氨基酸缺乏会引起人体的负平衡。

⑴酪 ⑵甘 ⑶丙 ⑷色 ⑸丝 5.谷氨酸脱羧基作用后，应生成 。

⑴胺 ⑵γ-氨基丁酸 ⑶谷氨酰胺 ⑷α-酮戊二酸 ⑸多胺 6.一碳单位与下列 氨酸有关。

⑴亮 ⑵天冬 ⑶组 ⑷脯 ⑸谷

7.假定某动物的组织蛋白含色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸三种氨基酸，其比例为1：1：1组成。今有以下几种饲料 的生理价值最高。 ⑴饲料甲 其色氨酸1g， 酪氨酸2g

⑵饲料乙 0.5g， 1g，苯丙氨酸1.5g ⑶饲料丙 1.5g， 1g， 0.5g ⑷饲料甲加饲料乙同用 ⑸ 加 同用

8.mRNA在蛋白质生物合成中起着 作用。

⑴起动因子 ⑵模板 ⑶提供场所 ⑷运输氨基酸 ⑸终止因子 9.下列 氨酸参与蛋白质多肽链的合成。

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⑴鸟氨酸 ⑵高型半胱氨酸 ⑶苏氨酸 ⑷β-丙氨酸 ⑸D-丙氨酸

10.下列 物质不能由酪氨酸在体内合成？

⑴甲状腺素 ⑵肾上腺素 ⑶尿黑素 ⑷苯丙氨酸 ⑸黑色素 11.苯丙-亮-丙-缬-苯丙-亮-缬，这条多肽符合下列 说法。 ⑴它是一个具有七个肽键的分子 ⑵可被胰蛋白酶水解

⑶对脂类表面无亲和性 ⑷具有pH7以上的等电点 ⑸是一个中性肽

12.低渗性脱水主要的症状是 。

⑴少尿 ⑵少汗 ⑶周围循环衰竭 ⑷使胰黏膜干燥 ⑸腱反射减弱

13.糖尿病患者用胰岛素治疗，应注意 离子的缺乏。 ⑴Ca2+ ⑵Zn2+ ⑶K+ ⑷Na+ ⑸Cl- 14.下列 离子能使心肌兴奋性降低？

⑴Ca2+ ⑵K+ ⑶Mg2+ ⑷Na+ ⑸OH- 15.血液中CO2最主要的运输形式是 。

⑴CO2 ⑵H2CO3 ⑶HCO3- ⑷HbNHCOOH ⑸HN-C-OPH 16.非竞争性抑制剂对酶的作用可能是抑制剂结合在 位置所致。

⑴酶的活性中心 ⑵活性中心的结合基团 ⑶活性中心非基团 ⑷辅酶 ⑸催化基团

17.同工酶具有相同的催化活性，是因其具有 。

⑴相同的理化性质 ⑵相同的免疫性质 ⑶相似或相同的酶活性中心 ⑷相同的分子结构 ⑸相同的辅酶 18.肌细胞收缩基本单位称为 。

⑴肌质网 ⑵肌节 ⑶乙 ⑷肌膜 ⑸明带 19.下列 化合物是三羧酸循环的中间产物？

⑴ ⑵ ⑶ ⑷ ⑸

20.食物中的甘油三酯经小肠消化吸收以后以 形式运输到脂肪组织中储存。 ⑴乳糜微粒 ⑵低密度脂蛋白 ⑶极低密度脂蛋白 ⑷卵磷脂 21.乙酰CoA合成脂肪酸主要在 中合成。

⑴线粒体 ⑵胞浆 ⑶核蛋白体 ⑷高尔基体 ⑸内质网 22.脂肪酸的氧化主要以 的方式进行。

⑴β-氧化 ⑵ω-氧化 ⑶α-氧化 ⑷脱氢 ⑸加氧

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23.一分子琥珀酸脱氢生成延胡索酸时，氢通过呼吸链氧化生成水，此时可生成 分子ATP？ ⑴ 1 ⑵ 2 ⑶ 3 ⑷ 4 ⑸ 5 24. 是丙酮酸羧化酶的辅酶。

⑴焦硫酸硫胺素 ⑵黄素单核苷酸 ⑶生物素 ⑷维生素PP ⑸维生素B6 25.具有生物活性的VD是 。

⑴维生素D3 ⑵维生素D2 ⑶1，25-（OH）2D3 ⑷25-（OH）-D3 ⑸2-脱氢胆固醇 三．填空题：

1.蛋白质在水溶液中保持不沉淀是因其具有 和 。 2.体内非必需氨基酸的合成是通过 进行的。

3.尿素的合成是在肝细胞 和 的结构中配合进行的。 4.酶活性中心的必需基团，可分为 和 基团两种。 5.机体合成代谢一般 能的，分解代谢是 能的。 6.糖酵解中的限速酶有 、 、和 。 讨论题部分： 1.如何证实肽键存在

2.如何检测在溶液中含有核酸 3.蛋白质是否变性

4.胰蛋白酶和胰蛋白酶原如何区别？ 5.常见的辅酶中哪几种含有糖基？

6.Knoop提出脂肪酸的β-氧化学说是根据什么实验？ 7.核苷酸生物途径有几类？各有何特点？ 8.RNA的二级结构有何特点？ 9.磷酸戊糖途径有何特点？

10.谷氨酸除了合成蛋白质，在生物体还有什么功用？ 11.酶在工业上应用有哪些优点？

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